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詳細(xì)介紹
微生物（PEPCase）試劑盒（ELISA）
產(chǎn)品簡介：
樣本類型：血清,、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本
檢測方法：雙抗夾心法
儲藏及保存：2-8度,，6個月
檢測原理：
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,，然后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體，將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值）,，計算樣品濃度。
產(chǎn)品內(nèi)容：
實驗所需儀器及設(shè)備：
實驗操作流程：
第一步：試劑盒室溫平衡 30min ,，然后從鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
第二步：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL。
第三步：樣本孔中加入待測樣本 50μL,；空白孔不加,。
第四步：除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體 100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
第五步：棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置 1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板 5 次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
第六步：每孔加入底物 A,、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min,。
第七步：每孔加入終止液 50μL,，15min 內(nèi)，在 450nm 波長處測定各孔的 O.D 值,。
注：
微生物（PEPCase）試劑盒（ELISA）
僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷!
為了幫助您更好地解決在實驗中可能碰到的各種問題，我們設(shè)計了這些問題指導(dǎo)，配以試劑盒內(nèi)的說明書一起供您參考使用,。很多因素都將導(dǎo)致免疫測定實驗的失敗,，而大多數(shù)技術(shù)失誤是可以通過全面閱讀和準(zhǔn)確理解說明書以及實驗步驟來避免的。若對試劑盒內(nèi)的說明書有任何意見和建議,，歡迎反饋,。我們期待聽到您的聲音，從而完善我們的產(chǎn)品,，更好地為您服務(wù),。
◆ 仔細(xì)閱讀說明書
◆ 檢查試劑盒標(biāo)簽上的有效期。如果超過有效期,，請勿使用,。
◆ 按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）
◆ 標(biāo)本制備要規(guī)范,，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備（貯存）,，盡量分裝做備份。
短期內(nèi)無法實驗者,，注意低溫保存
◆ 準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品,， （比如移液器，試管,，清洗器,， 酶標(biāo)儀）
◆ 按說明書將所用試劑平衡至室溫，根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
◆ 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件,，保證所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說明書推薦的條件存儲,。
◆ 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液（比如沉淀或變色）。有些試劑,，比如標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液或者檢測稀釋液,，可能在設(shè)計時就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標(biāo)板之前,，必需充分混勻,。而由于沉淀物的特性，在加入酶標(biāo)板之前,，必需不停攪拌,。
◆ 保證充分的孵育時間和溫度。
◆ 切勿使用不同生產(chǎn)批號的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑,。
◆ 在混合或溶解蛋白溶液時,，避免泡沫產(chǎn)生。
◆ 在實驗開始之前,，安排好實驗流程,。
◆ 在實驗開始之前,，清潔工作臺。
◆ 若有問題,，應(yīng)與我公司或代理商進(jìn)行溝通,。
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