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詳細介紹
昆蟲組織蛋白酶B（CTSB）ELISA試劑盒
產(chǎn)品簡介：
樣本類型：血清,、血漿、組織,、細胞上清或其他生物樣本
檢測方法：雙抗夾心法
儲藏及保存：2-8度,，6個月
檢測原理：
將目標抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體,，向微孔中分別加入標準品或標本,，其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入辣根過氧化物酶標記的抗體,，將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度,。
產(chǎn)品內(nèi)容：
實驗所需儀器及設(shè)備：
實驗操作流程：
第一步：試劑盒室溫平衡 30min ,，然后從鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
第二步：設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL。
第三步：樣本孔中加入待測樣本 50μL,；空白孔不加,。
第四步：除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
第五步：棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置 1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板 5 次（也可用洗板機洗板）,。
第六步：每孔加入底物 A,、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
第七步：每孔加入終止液 50μL,，15min 內(nèi),，在 450nm 波長處測定各孔的 O.D 值。
注：
昆蟲組織蛋白酶B（CTSB）ELISA試劑盒
僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷!
◆ 仔細閱讀說明書
◆ 檢查試劑盒標簽上的有效期,。如果超過有效期，請勿使用,。
◆ 按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量,、體積）
◆ 標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備（貯存）,，盡量分裝做備份,。
短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存
◆ 準備好所有實驗額外所需物品,， （比如移液器,，試管,，清洗器,， 酶標儀）
◆ 按說明書將所用試劑平衡至室溫，根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量
◆ 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件,，保證所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說明書推薦的條件存儲,。
◆ 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液（比如沉淀或變色）。有些試劑,，比如標準品稀釋液或者檢測稀釋液,，可能在設(shè)計時就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標板之前,，必需充分混勻,。而由于沉淀物的特性，在加入酶標板之前,，必需不停攪拌,。
◆ 保證充分的孵育時間和溫度。
◆ 切勿使用不同生產(chǎn)批號的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑,。
◆ 在混合或溶解蛋白溶液時,，避免泡沫產(chǎn)生。
◆ 在實驗開始之前,，安排好實驗流程,。
◆ 在實驗開始之前，清潔工作臺,。
◆ 若有問題,，應(yīng)與我公司或代理商進行溝通。
我的標準曲線是平的或者是非線性的，這可能是由于什么原因引起的,？
引起不理想的標準曲線的原因有很多,，常見的原因例舉如下：
◆ 確定稀釋是否得當(dāng)。
◆ 確定波長是否正確,。
◆ 標準品和樣品必需在15-20分鐘內(nèi)滴加入板內(nèi),。（除非試劑盒內(nèi)說明書特別說明）
◆ 檢查背景是否過高。
◆ 確定酶標板是否正確洗滌,。 不恰當(dāng)?shù)南礈炜赡軙鹁哂懈弑尘暗钠街鼻€,。
◆ 在測定過程中重復(fù)讀板。在超過建議時間后讀板會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果,。
◆ 如果高的標準品的讀數(shù)超過了酶標儀的范圍,，確定標準品是否正確溶解，孵育時間和溫度是否準確,。
◆ 為保證實驗準確性請重復(fù)測定,。
◆ 如果使用對照，對照的濃度必須在測定范圍內(nèi),。
◆ 在檢測和孵育過程中確定試劑沒有被污染,。
◆ 沒有任何信號的平直標準曲線可能是由于酶結(jié)合物或者底物沒有反應(yīng)。 檢查各個操作過程
◆ 由于許多酶標儀的限制,，因此建議標準品檢測由高向低做復(fù)孔,。
我是否可以更改底物處理的方法？
◆ 如果反應(yīng)物溶液需要混合,，確保加入的反應(yīng)物試劑體積正確并充分混合,。混合后的溶液必需在15分鐘內(nèi)使用（化學(xué)發(fā)光檢測多4小時）,。如果反應(yīng)物混合得太早,，則在容器中的顏色可能會發(fā)生變化。
◆ 如果底物是凍干品或片劑,，則根據(jù)說明書中的方法用適當(dāng)體積的稀釋液將其*溶解,。混合*后并在說明書中推薦的時間內(nèi)使用,。
我在移液的時候是否要按照一定的順序,？
◆ 根據(jù)說明書中的順序進行移液操作。
◆ 高靈敏度檢測利用了放大系統(tǒng),。在底物孵育完成之后,，按照加底物的順序依次加入放大試劑。
◆ 底物加完之后,，輕拍酶標板使其充分混合,。
底物有可能被污染嗎,？
◆ 是的。如果測定時使用的是堿性磷酸酶或者辣根過氧化物酶標記的結(jié)合物,，在測定時要注意避免污染,。污染可能會導(dǎo)致產(chǎn)生超過酶標儀范圍的值。避免與金屬或氧化試劑接觸,。使用新容器,。
底物是否需要在黑暗環(huán)境中進行孵育？
◆ 不需要,。不過在孵育過程中應(yīng)避免陽光直射,。
茁彩生物秉承“服務(wù)至上，質(zhì)量為本"的宗旨,，堅持“誠信,、創(chuàng)新、奮斗,、務(wù)實"的企業(yè)文化,，為中國生命科學(xué)事業(yè)貢獻力量。ZCIBIO®產(chǎn)品獲得市場的廣泛認可,，面對的客戶群體主要有高校,，醫(yī)院，科研院所以及企業(yè)用戶,，其產(chǎn)品受到*,。同時,，在我們的不斷努力和各位同仁的幫助下,，ZCIBIO®產(chǎn)品以銷往國內(nèi)各個省市地區(qū)，現(xiàn)已授權(quán)的區(qū)域代理商（包括二級）超過30多家,。
從今日起,，凡購買上海茁彩生物品牌的Elisa試劑盒，均可提供免費待測服務(wù),，為您提供專業(yè)的指導(dǎo),，在Elisa實際操作過程中，如遇到任何問題均可咨詢,。
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