詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn):
項(xiàng)目編號(hào) | 項(xiàng)目名稱(chēng) | 計(jì)價(jià)單位 | 單價(jià) |
ZC1128 | [免疫熒光/IF] - FJB染色 | 張 | 55元 |
服務(wù)介紹:
FJB染色的原理是FJB染液是一種帶熒光的物質(zhì),可以與變性的神經(jīng)元結(jié)合從而發(fā)綠色熒光,,而正常神經(jīng)元不會(huì)與FJB染液結(jié)合所以不發(fā)熒光,。
FJB可以與變性神經(jīng)元結(jié)合發(fā)出綠色熒光,從而可以標(biāo)記神經(jīng)組織內(nèi)的變性壞死神經(jīng)元,??梢越璐搜芯坎煌幚矸椒▽?duì)神經(jīng)組織的損傷。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示:
![免疫熒光/IF - FJB染色](https://img66.chem17.com/1697e381d5facf78763ead72231aabf87a0e21db5593f7c6e45706aeb16bb3206f3ae1a99a8130b7.jpg)
實(shí)驗(yàn)流程:
純水配成5mg/ml的濃縮液,,用時(shí)0.1%的冰醋酸做溶劑,,1:50-1:100稀釋
染色方法
1、石蠟切片脫蠟至水,。
2,、用現(xiàn)配的0.1%冰醋酸做溶劑,按1:50-1:100配制FJB的工作液,,混勻,,滴加到組織上室溫孵育20min;
3,、純水沖洗,DAPI染核,,再用PBS沖洗;
4,、吹風(fēng)機(jī)吹干,二甲苯透明2min,,加一滴中性樹(shù)脂封片,,晾干。
結(jié)果判讀:
壞死神經(jīng)元胞漿和胞核呈綠色熒光,,正常神經(jīng)元無(wú)著色,。神經(jīng)元著色有時(shí)候伴隨著腦梗,在梗死附近著色較明顯,。
注意事項(xiàng):
1,、FJB染色中用到的0.1%的冰醋酸要現(xiàn)配現(xiàn)用。
2,、所有染色步驟完成后,,切片要自然晾干或用吹風(fēng)機(jī)低檔吹干,然后透明,,樹(shù)膠封片,,因?yàn)橐呀Y(jié)合的FJB可溶于甘油,酒精,,所以不能直接用熒光封片劑封片,,也不能在酒精中做脫水處理。
3,、FJB與組織的結(jié)合可逆,,因此做完后要盡快鏡檢拍照,避免熒光淬滅,。