詳細介紹
樹脂包埋(透射電鏡)
樹脂包埋(透射電鏡)
樹脂包埋實驗步驟:
1,、取材:電鏡取材非常嚴格,,取材過程中速度要快,5分鐘內(nèi)要將組織取出放入固定液中,;取材組織塊要小,,一般要求將組織切成1立方毫米大小,;取材部位要準確,、取材溫度要低是在4℃條件下進行,;取材工具要干凈,鋒利,。如果是貼壁細胞不可用酶消化下來,,先吸去培養(yǎng)液然后加入電鏡固定液用橡膠塊刮下細胞,離心,,細胞體積保證綠豆大小即可,,然后吸去上清更換固定液繼續(xù)固定。
2,、固定:取材后要及時固定,,組織、細胞,、蛋白等固定選用2.5%中性戊二醛固定液,,植物等標本則需要選用多聚甲醛和戊二醛的混合固定液。室溫固定兩小時左右后,,放入4℃保存運輸(如果是植物或者肺組織,,則需要進行真空抽氣固定,一般需要抽氣固定24小時左右,,直至標本*沉入容器底部),。
3、鋨酸后固定:將標本從固定液中取出,,用0.1mol/L的PB清洗并過夜,,第二天轉(zhuǎn)入1%鋨酸后固定,固定時間普通標本2h左右,,植物標本8至12h左右,。
4、脫水:鋨酸固定后的標本用用0.1mol/L的PB清洗后使用梯度乙醇脫水,,濃度依次是50%,、70%、80%,、90%,、95%、100%,,植物標本則會在50%乙醇前面再增加一個30%乙醇梯度,,脫水時間普通標本為10~15min,植物標本脫水時間為1~1.5h4,、浸透:用丙酮作為乙醇和樹脂間的過度溶劑,,從純丙酮開始,中間經(jīng)過丙酮和樹脂的混合劑,混合比例丙酮從高到低到純樹脂,,整個浸透過程需要1~2天完成,。
5、包埋:先將組織對應(yīng)的標簽放包埋板中,,然后加入樹脂,,再將浸透好的樣本放入包埋板中,調(diào)整好包埋面,,然后放入恒溫箱內(nèi)熟化,,熟化過程需要2~3天。熟化完成后,,樣本樹脂包埋完成,。
上海茁彩生物科技有限公司,可以承接諸多病理實驗,樣本不僅含有基礎(chǔ)的動物組織切片,,還包括植物葉片,、動物細胞、骨片,、腦片,、皮膚等特殊樣本。染色種類多,,染色方法全.石蠟染色,,冰切染色均可操作,同時還可以承接整體實驗項目,細胞實驗項目,包括樣本的造模,細胞的培養(yǎng),以及后續(xù)細胞的增殖、細胞粘附,、細胞劃痕等實驗.
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