詳細(xì)介紹
一.實(shí)驗(yàn)步驟:
1、取材固定:將老鼠殺死后,,立刻取腦組織置于4%的多聚甲醛液中固定24h以上,。
2,、高爾基染色:用生理鹽水將腦組織輕輕漂洗幾遍,,將需要的實(shí)驗(yàn)部位切成2-3mm厚的腦組織塊,,高爾基染液將腦組織塊*浸沒(méi),放置陰涼通風(fēng)處避光處理14天,,浸泡48h后,,換一次新染液,,之后每隔3天換一次新染液,。
3,、組織塊脫水:將組織塊取出,,置于15%的蔗糖溶液中4℃且避光條件下脫水約1天,,取出組織塊,置于30%的蔗糖溶液中4℃且避光條件下脫水2天,。
4,、顯影:將組織塊取出,,蒸餾水洗1min,濃氨水處理45min,,蒸餾水洗1min,,定影液處理45min,,蒸餾水洗1min,。
5,、脫水冰切封片:置于30%的蔗糖溶液中4℃且避光條件下脫水2-3天,,冰凍切片100um,甘油明膠封片,,拍照保存結(jié)果。
6,、顯微鏡鏡檢,,圖像采集分析。
二,、結(jié)果判讀:
神經(jīng)元呈黑色,,膠質(zhì)細(xì)胞呈黑色,,背景灰色或者棕黃色。
三,、高爾基染色的注意事項(xiàng):
1、染液配制的量需要根據(jù)實(shí)際情況來(lái)定,,配制過(guò)多易造成浪費(fèi),。
2、染液一定要避光保存,,并且實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的每一步操作都要求避光,。
3、染色完成后,,若客戶需要返還組織塊,,將剩余組織塊放在30%的蔗糖中4℃避光運(yùn)輸,。
四,、公司介紹:上海茁彩生物科技有限公司,可以承接諸多病理實(shí)驗(yàn),,樣本不僅含有基礎(chǔ)的動(dòng)物組織切片,,還包括植物葉片,、動(dòng)物細(xì)胞,、骨片,、腦片、皮膚等特殊樣本。染色種類多,染色方法全.石蠟染色,,冰切染色均可操作,同時(shí)還可以承接整體實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,包括樣本的造模,細(xì)胞的培養(yǎng),以及后續(xù)細(xì)胞的增殖,、細(xì)胞粘附、細(xì)胞劃痕等實(shí)驗(yàn),。