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3-磷酸甘油醛含量檢測|茁彩生物
閱讀:196 發(fā)布時(shí)間:2025-3-43-磷酸甘油醛(3-phosphoglyceraldehyde)確實(shí)是生物體內(nèi)糖原或淀粉酵解過程中的一個(gè)重要中間產(chǎn)物,。
產(chǎn)生過程
在生物體內(nèi),,3-磷酸甘油醛主要由果糖-1,6-二磷酸在醛縮酶的催化下產(chǎn)生,。果糖-1,6-二磷酸的C3和C4之間的鍵在醛縮酶的作用下斷裂,生成一分子3-磷酸甘油醛和一分子磷酸二羥丙酮,。隨后,,磷酸二羥丙酮在丙糖磷酸異構(gòu)酶的催化下轉(zhuǎn)化為另一分子3-磷酸甘油醛,以便進(jìn)一步進(jìn)行酵解,。
在酵解過程中的反應(yīng)
在糖酵解途徑中,,3-磷酸甘油醛參與了兩個(gè)關(guān)鍵反應(yīng):
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氧化反應(yīng):在NAD+和H3P04的存在下,3-磷酸甘油醛由3-磷酸甘油醛脫氫酶催化生成1,3-二磷酸甘油酸。
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后續(xù)反應(yīng):1,3-二磷酸甘油酸會(huì)進(jìn)一步經(jīng)過磷酸甘油酸激酶,、磷酸甘油酸變位酶,、烯醇化酶和丙酮酸激酶等酶的催化,最終生成丙酮酸,,并伴隨ATP的生成,。
生物學(xué)意義
3-磷酸甘油醛在由糖轉(zhuǎn)化為生物能的反應(yīng)以及肝內(nèi)各種單糖間相互轉(zhuǎn)化中具有十分重要的生物學(xué)意義。它是連接糖酵解途徑上下游的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn),,對于維持生物體內(nèi)的能量平衡和糖代謝穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要,。
與果糖-1,6-二磷酸的關(guān)系
果糖-1,6-二磷酸不僅是生成3-磷酸甘油醛的前體,也是糖酵解途徑中的一個(gè)重要中間產(chǎn)物,。它在磷酸果糖激酶的催化下由6-磷酸果糖生成,,并消耗一個(gè)ATP分子。果糖-1,6-二磷酸和3-磷酸甘油醛共同參與了糖酵解途徑中的多個(gè)關(guān)鍵反應(yīng),,為生物體提供了必要的能量和代謝中間產(chǎn)物,。
測定方法
酶聯(lián)法:
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原理:
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利用甘油-3-磷酸脫氫酶(GPDH)催化G3P與NAD?反應(yīng)生成DHAP和NADH,通過檢測340 nm吸光度變化定量G3P,。
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反應(yīng)式:
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G3P + NAD? → DHAP + NADH + H?
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優(yōu)點(diǎn):操作簡便,、成本低,適用于批量檢測,。
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缺點(diǎn):易受樣本中其他脫氫酶底物(如乳酸,、乙醇)干擾。
高效液相色譜(HPLC):
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原理:通過反相色譜柱分離,,紫外檢測(210 nm)或熒光衍生化(如鄰苯二甲醛)定量,。
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優(yōu)點(diǎn):特異性高,可同時(shí)檢測多種代謝物(如DHAP,、乳酸),。
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缺點(diǎn):需復(fù)雜樣本前處理,設(shè)備成本高,。
質(zhì)譜法:
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原理:液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS/MS),,多用于代謝組學(xué)研究。
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優(yōu)點(diǎn):超高靈敏度,,可區(qū)分同分異構(gòu)體(如2-磷酸甘油酸),。
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缺點(diǎn):儀器昂貴,需專業(yè)技術(shù)支持,。