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多巴胺(DA)ELISA試劑盒的應用原理是怎樣的?
閱讀:1327 發(fā)布時間:2023-1-9 多巴胺(DA)ELISA試劑盒運用雙抗體夾心ELISA法定量測定其他血清,、血漿,、組織勻漿、細胞裂解液,、細胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中多巴胺(DA)ELISA試劑盒含量,。將多巴胺(DA)抗體包被于孔微孔板中,制成固相載體,,向微孔中分別加入標準品或標本,,其中的多巴胺(DA)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的多巴胺(DA)抗體,,將未結合的生物素化抗體洗凈后,,加入HRP標記的親和素,再次洗滌后加入TMB底物顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的多巴胺(DA)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值,,計算樣品濃度。
多巴胺(DA)ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)已知待測物質濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測,。先將待測物質和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,,加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,,然后加入底物A,、B,和酶結合物同時作用,,產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系。
多巴胺(DA)ELISA試劑盒使用注意事項:
1,、從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘,。酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2,、各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差,。
3、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,。
4,、為避免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。
5、不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質前使用。
6,、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,。