1、合適的細胞培養(yǎng)基
合適的細胞培養(yǎng)基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一,，培養(yǎng)基不僅提供細胞營養(yǎng)和促使細胞生長增殖的基礎物質(zhì),，而且還提供培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。
2,、血清
目前,，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細胞培養(yǎng)液中重要的成分之一,，含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yǎng)成分,。
3、無菌無毒細胞培養(yǎng)環(huán)境
無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件,。
在體外培養(yǎng)的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力,，一旦被微生物或有毒物質(zhì)污染，或者自身代謝物質(zhì)積累,，可導致細胞中毒死亡,。因此，在體外培養(yǎng)細胞時,，必須保持細胞生存環(huán)境無菌無毒,，及時清除細胞代謝產(chǎn)物。
4,、恒定的細胞生長溫度
維持培養(yǎng)細胞旺盛生長,，必須有恒定而適宜的溫度。不同種類的細胞對培養(yǎng)溫度要求也不同,，人體細胞培養(yǎng)的標準溫度為36,。5℃±0。5℃,，偏離這一溫度范圍,，細胞的正常代謝會受到影響，甚至死亡,。
培養(yǎng)細胞對低溫的耐受力較對高溫強,，溫度上升不超過39℃時,，細胞代謝與溫度成正比；人體細胞在39-40℃1小時,，即能受到一定損傷,，但仍有可能恢復；在40-41℃1小時,，細胞會普遍受到損傷,，僅小半數(shù)有可能恢復；41-42℃1小時,，細胞受到嚴重損傷,，大部分細胞死亡，個別細胞仍有恢復可能,；當溫度在43℃以上1小時,，細胞全部死亡。
相反,，溫度不低于0℃時,，對細胞代謝雖有影響，但并無傷害作用,；把細胞放入25-35℃時,，細胞仍能生存和生長，但速度減慢,；放在4℃數(shù)小時后,，再回到37℃培養(yǎng)，細胞仍能繼續(xù)生長,。細胞代謝隨溫度降低而減慢,。當溫度降至冰點以下時，細胞可因胞質(zhì)結冰受損而死亡,。
但是,，如果向培養(yǎng)液中加入一定量的冷凍保護劑(二甲亞砜或甘油)，可在深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長期保存,。
5,、合適的氣體環(huán)境
氣體是哺乳動物細胞培養(yǎng)生存必需條件之一，所需氣體主要有氧氣和二氧化碳,。
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