當(dāng)重要的培養(yǎng)污染時(shí),研究者可能試圖消除或控制污染,。首先,,確定污染物是細(xì)菌、真菌,、支原體或酵母,,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開(kāi),用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái),,檢查HEPA過(guò)濾器,。 高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對(duì)一些細(xì)胞系有毒性,因而,,做劑量反應(yīng)實(shí)驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平,。這點(diǎn)在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂(lè)菌素時(shí)尤其重要。下面是我司推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實(shí)驗(yàn)步驟:
1. 在無(wú)抗生素的培養(yǎng)基中消化,、計(jì)數(shù)和稀釋細(xì)胞,,稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。
2. 分散細(xì)胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,,或幾個(gè)小培養(yǎng)瓶中,。在一個(gè)濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗生素加入到每一個(gè)孔中,。例如,,兩性霉素B推薦下列濃度,0.25,,0.50,,1.0,2.0,,4.0,8.0 mg/ml,。
3. 每天觀測(cè)細(xì)胞毒性指標(biāo),如脫落,,出現(xiàn)空泡,,匯合度下降和變圓。
4. 確定抗生素毒性水平后,,使用低于毒性濃度2~3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞2~3代,。
5. 在無(wú)抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞一代。
6. 重復(fù)步驟4,。
7. 在無(wú)抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4~6代,,確定污染是否以已被消除,。
我司分析細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù),,還是其中之一的生物克隆技術(shù)來(lái)說(shuō),細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)不可少的過(guò)程,。
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