(1)取材要注意新鮮和保鮮 新鮮組織易于培養(yǎng)成功,取材時應盡量在4~6h內能制作成細胞,,盡快入箱培養(yǎng),,若不能即時培養(yǎng),應將組織浸泡于培養(yǎng)液內,,于4℃存放,。若組織塊較大,應在清除表面壞死組織,、脂肪和結締組織后,,切碎于培養(yǎng)液內4℃存放,但時間不能超過24h,。對于已切碎的組織或血液,、淋巴組織應加入含10%二甲基亞砜的培養(yǎng)基,按細胞凍存方式于液氮中冷凍保存。
(2)取材應嚴格無菌 所取標本材料應在無菌條件下進行,,為了確保無菌,,對所取材料若疑有污染的可能,應將所取組織在含高濃度抗菌素(400單位/mL)甚加入適量的兩性霉素B或10%達克寧液的培養(yǎng)液內于4℃下存放2小時以上,,再用PBS洗2~3次,,以確保所取材料無菌。要用無菌包裝的器皿或事先消毒好的帶少許培養(yǎng)液(內含400單位/mL抗菌素)的小瓶等便于攜帶的物品來取材,,所取材料應避免接觸有毒有害的化學物質,,如碘、汞等,。
(3)取材和原代細胞制作時,,要用鋒利的器械,如手術刀或剃須刀片切碎組織,,盡可能減少對細胞的機械損傷,。
(4)要仔細去除所取材料上的血液、脂肪,、壞死組織及結締組織,,切碎組織時應避免組織干燥,可在含少量培養(yǎng)液的器皿中進行,。
(5)取材應注意組織類型,、分化程度、年齡等,,一般來講,,胚胎組織較成熟個體組織容易培養(yǎng),分化低的較分化高的組織容易生長,,腫瘤組織較正常組織容易培養(yǎng),。取材時應盡量選用易培養(yǎng)的組織進行培養(yǎng)。
(6)原代細胞取材時要同時留好組織學標本和電鏡標本,。對組織的來源,、部位、包括供體的一般情況要做詳細的記錄,,以備以后查詢。
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