高效液相色譜—熒光檢測(cè)器（天瑞儀器）；雙酚A標(biāo)準(zhǔn)品(Dr. Ehrenstorfer GmbH公司),；甲醇(TEDIA公司,，色譜純)；水(娃哈哈公司,，1.25 L瓶裝純凈水),。

雙酚A標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1 000 mg/L)：精密稱取10.0 mg雙酚A標(biāo)準(zhǔn)品到10 mL容量瓶中，用甲醇作溶劑溶解,，定容,，混勻,。

雙酚A標(biāo)準(zhǔn)中間液(10.0 mg/L)：移取雙酚A標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.10 mL于10 mL容量瓶中，用50%甲醇溶液稀釋到刻度,，4℃避光冷藏,，至少可存放4周。

雙酚A標(biāo)準(zhǔn)使用液(0.10 mg/L)：移取10.0 mg/L雙酚A標(biāo)準(zhǔn)中間液0.10 mL于10 mL容量瓶中,，用水稀釋到刻度,，臨用時(shí)配制。

校準(zhǔn)曲線系列：用純水分別稀釋雙酚A標(biāo)準(zhǔn)使用液,，得到0.0,、0.002、0.005,、0.01,、0.02和0.04 mg/L校準(zhǔn)曲線系列溶液。

用移液器將1 mL水樣移入塑料離心管中,，在離心機(jī)中以轉(zhuǎn)速為12 000轉(zhuǎn)/min離心15 min后,，轉(zhuǎn)移到進(jìn)樣小瓶，上機(jī)測(cè)定,。

色譜柱：C18反相色譜柱(天瑞儀器公司,，型號(hào)Eclipse XDB，4.6×250 mm,，5 μm),，柱溫35℃；流動(dòng)相：甲醇/水(體積比70/30),，流速為1.0 mL/min,；進(jìn)樣量100 μL；熒光激發(fā)波長(zhǎng)為228 nm,，發(fā)射波長(zhǎng)為312 nm,。

校準(zhǔn)曲線溶液與樣品溶液依次進(jìn)樣，記錄峰高或峰面積,，以校準(zhǔn)曲線溶液的峰高或峰面積為縱坐標(biāo),，BPA含量(ng)為橫坐標(biāo)繪制校準(zhǔn)曲線，從校準(zhǔn)曲線上查出水樣中BPA含量,。

BPA溶于甲醇,，幾乎不溶于水(21.5℃下溶解度＜0.1 g/100 mL水)，故用甲醇配制儲(chǔ)備液,。待測(cè)樣為水樣,，選擇純水作為校準(zhǔn)曲線溶液的溶劑。標(biāo)準(zhǔn)中間液(10.0 mg/L)的濃度介于儲(chǔ)備液(1 000 mg/L)與標(biāo)準(zhǔn)使用液(0.10 mg/L)之間，采用甲醇水混合溶液作溶劑,。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)中間液(10.0 mg/L)每7 d測(cè)定1次(測(cè)定前稀釋到1.0 mg/L)，連續(xù)4次,，測(cè)定結(jié)果分別為10.12,、9.93、9.95與10.08 mg/L,，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.94%,。這表明4℃避光保存條件下，標(biāo)準(zhǔn)中間液4周內(nèi)無(wú)衰減,。

選擇常用的甲醇與水的混合溶液作為流動(dòng)相,。隨著水相比例的提高，保留時(shí)間延長(zhǎng),，峰高降低,。當(dāng)水相比例為30%時(shí)，保留時(shí)間為6.0 min,；水相比例為35%時(shí),，保留時(shí)間為8.2 min，峰高降低到原來(lái)的74.1%,。為了提高方法的靈敏度,，在無(wú)干擾情況下，應(yīng)盡量縮短保留時(shí)間,，故本方法選擇水相比例為30%,。取空白樣品加標(biāo)，使加標(biāo)后濃度為0.01 mg/L,，加標(biāo)樣品的色譜圖見(jiàn)圖 2,。

1.死體積峰(1.9 min)；2.雙酚A(6.0 min)圖 2 濃度為0.01 mg/L加標(biāo)樣品的色譜圖

圖選項(xiàng)

首先采用常用的230 nm作為激發(fā)波長(zhǎng),，掃描得到發(fā)射波長(zhǎng)光譜圖(圖 3),，由圖 3選定312 nm為靈敏發(fā)射波長(zhǎng)。然后固定發(fā)射波長(zhǎng),，掃描激發(fā)波長(zhǎng),，得到激發(fā)波長(zhǎng)光譜圖(圖 4)，由圖 4選定228 nm為靈敏激發(fā)波長(zhǎng),。文獻(xiàn)采用的激發(fā)波長(zhǎng)/發(fā)射波長(zhǎng)有275 nm/313 nm,，275 nm/305 nm，由于不是靈敏的波長(zhǎng),，所以其線性范圍低點(diǎn)的濃度僅能達(dá)到0.03 mg/L[7-8],。

圖 3 BPA的熒光發(fā)射波長(zhǎng)光譜圖

圖選項(xiàng)

圖 4 BPA的熒光激發(fā)波長(zhǎng)光譜圖

圖選項(xiàng)

100 μL定量環(huán)是高效液相色譜儀的標(biāo)準(zhǔn)配置。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨著進(jìn)樣體積為10,、20,、50、100 μL逐步增大,，其色譜峰峰高,、峰面積線性提高，而半峰寬,、保留時(shí)間及拖尾因子沒(méi)有明顯變化,。為了獲得最高靈敏度，選擇100 μL作為進(jìn)樣體積,。

在色譜進(jìn)樣前,，被測(cè)水樣，尤其對(duì)水源水,，要除去樣品中的懸浮物,。過(guò)濾法與離心法是常用的兩種方法。試驗(yàn)中取0.01 mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL分別裝到3個(gè)進(jìn)樣小瓶中,，然后分別采用了過(guò)濾(尼龍膜針式濾器),、離心(塑料離心管)及無(wú)處理3種方式。結(jié)果表明針式濾器濾膜把待測(cè)物全部吸附,，塑料離心管對(duì)待測(cè)物無(wú)任何干擾,。

BPA線性范圍在0~0.04 mg/L之間，其進(jìn)樣絕對(duì)質(zhì)量(ng)與峰高,、峰面積呈線性,。線性方程分別為Y=0.782X，Y=13.2X,。線性相關(guān)系數(shù)r均為0.999,。

濃度為0.002 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣10次，求出BPA峰高的標(biāo)準(zhǔn)偏差(Sb),，乘以10倍的信噪比,，再除以校準(zhǔn)曲線的斜率(S)，得到低檢測(cè)濃度(LOQ)為0.0011 mg/L,。本方法低檢測(cè)濃度為0.002 mg/L,。

在純凈水中添加不同體積BPA溶液，制成3個(gè)濃度水平的樣品,，其濃度分別為0.002,、0.01和0.02 mg/L，每個(gè)濃度水平樣品平行測(cè)定6次,。其3個(gè)濃度水平的平均回收率在95%~105%之間,。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)＜2%(n=6,，表 1)。

用本方法對(duì)江蘇省南京市5個(gè)水廠(南京北河口,、南京上元門,、南京城南、南京城北,、南京浦口)出廠水水樣進(jìn)行檢測(cè),，均未檢出BPA。

對(duì)本單位實(shí)驗(yàn)室10份末梢水進(jìn)行檢測(cè),，未檢出BPA，說(shuō)明塑料輸配水管材不會(huì)對(duì)自來(lái)水造成污染,。然而對(duì)實(shí)驗(yàn)室,、辦公室的臺(tái)式飲水機(jī)放出的開(kāi)水冷卻后進(jìn)行檢測(cè)，檢出BPA濃度為16.7 ng/mL,，超出*67%,。可見(jiàn),，臺(tái)式飲水機(jī)會(huì)造成BPA污染,，建議今后應(yīng)在飲水機(jī)類涉水產(chǎn)品的檢測(cè)中增加BPA檢測(cè)項(xiàng)目。

“雙酚A奶瓶事件"引起社會(huì)對(duì)BPA高度關(guān)注,。已報(bào)道的水中BPA的檢測(cè)方法都要進(jìn)行樣品富集,，這樣一方面增加了工作量，另一方面導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果偏差增大,。本實(shí)驗(yàn)從儀器檢測(cè)波長(zhǎng),、進(jìn)樣量、流動(dòng)相比例等方面進(jìn)行了充分優(yōu)化,，使儀器檢測(cè)靈敏度大大提高,，從而避免了樣品富集步驟。本方法快速,、靈敏,、準(zhǔn)確性高，可適用于水源水及生活飲用水監(jiān)測(cè),。