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菌種的保存方法及管理
菌種保存
保存菌種用的培養(yǎng)基必須能維持使微生物長期生存且不出現(xiàn)生長或新陳代謝過于旺盛的情況,，菌株能較長時間存活且保
持性狀穩(wěn)定,。
1.菌種保存的注意事項
(1)不能用含有可發(fā)酵性糖的培養(yǎng)基保存菌種。
(2)不可以使用選擇性培養(yǎng)基,，不能從藥敏試驗平板培養(yǎng)基上留取菌株,。
(3)不可使培養(yǎng)菌干枯，所有試管要保持良好的密封性,。
(4)對溫度變化敏感的細菌,，如淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌，不可貯存于冰箱,，但可用快速冷凍干燥法長期保存。
(5)作為抗菌藥物敏感試驗用的標準菌株,，由保存狀態(tài)取出后,，不能連續(xù)使用1 周以上，應定期傳代,，但一般不超過6 次,，必要時進行更換。
2.菌種保存的方法
保存菌種的方法，應根據(jù)菌種的類型和保存目的進行選擇,，一般包括以下幾種方法：
(1)培養(yǎng)基保存法：此法不需要特殊設備,，并可隨時提供使用，為常用的一種保存方法,，其缺點是易發(fā)生變異,。營養(yǎng)要求
不高的細菌，可用半固體保存法,，一般2～3月轉種1次,，并檢查菌株特性，如特性已改變,，則需丟棄,。特殊培養(yǎng)要求的細菌，如流感嗜血桿菌可接種巧克力瓊脂斜面,，密封后冰箱貯存,，每2周轉種1次。淋病奈瑟菌保存于巧克力瓊脂,，每天或隔天轉種1 次,，不宜4 ℃冰箱保存，因易死亡,。
(2)快速冷凍法：將純培養(yǎng)細菌在液體培養(yǎng)基上增菌后,，取數(shù)個新鮮菌落加入含小牛血清或脫纖維綿羊血的培養(yǎng)基內制成濃菌懸液，再放人無菌玻璃珠,，將此瓶放入－30℃以下低溫冰箱保存,。需要時用無菌鑷子取出1 粒玻璃珠置增菌培養(yǎng)液中，增菌培養(yǎng)后即可獲得新鮮菌種,。用此方法,，大部分細菌可保存6 ～12 月，甚至更長時間,。
(3)冷凍干燥法：是菌種保存最佳方法,，可以免去細菌因頻繁傳代而造成菌種污染、變異和死亡,。此法需冷凍干燥設備,，操作較費時，但適用于需要長期保存的菌種,。
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菌種管理
(1)實驗室保存菌種需按規(guī)定時間轉種,，每轉種3代作一次鑒定，并有詳細記錄卡,，包括菌種名稱,、編號,、來源、保存日期,、傳代情況等,。
(2)實驗室保存菌株不得擅自處理或帶出實驗室，如確需要帶離實驗室,，須經上級領導批準,，并做好詳細的記錄。
(3)菌種應有專人保管,，如遇工作調動,，應及時做好交接工作。
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