產(chǎn)品分類品牌分類
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高效液相色譜儀操作步驟與注意事項(xiàng)
高效液相色譜儀操作步驟:
1).過濾流動(dòng)相,,根據(jù)需要選擇不同的濾膜,。
2).對抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3).打開HPLC工作站(包括計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀),,連接好流動(dòng)相管道,,連接檢測系統(tǒng)。
4).進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,,點(diǎn)擊manual,,進(jìn)入手動(dòng)菜單。
5).有一段時(shí)間沒用,,或者換了新的流動(dòng)相,,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵,,直接在泵的出水口,,用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥,,需要在manual菜單下,,先點(diǎn)擊purge,再點(diǎn)擊start,,沖洗時(shí)速度不要超過10ml/min,。
6).調(diào)節(jié)流量,初次使用新的流動(dòng)相,,可以先試一下壓力,,流速越大,,壓力越大,一般不要超過2000,。點(diǎn)擊injure,,選用合適的流速,點(diǎn)擊on,,走基線,,觀察基線的情況。
7).設(shè)計(jì)走樣方法,。點(diǎn)擊file,選取selectusersandmethods,,可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法,。若需建立一個(gè)新的方法,點(diǎn)擊newmethod,。選取需要的配件,,包括進(jìn)樣閥,泵,,檢測器等,,根據(jù)需要而不同。選完后,,點(diǎn)擊protocol,。一個(gè)完整的走樣方法需要包括:a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流,一般2-5分鐘;b.基線歸零;c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換;d.走樣時(shí)間,,隨不同的樣品而不同,。
8).進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法,,點(diǎn)擊start,。進(jìn)樣,所有的樣品均需過濾,。方法走完后,,點(diǎn)擊postrun,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等,。全部樣品走完后,,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物,。
9).關(guān)機(jī)時(shí),,先關(guān)計(jì)算機(jī),再關(guān)液相色譜,。
10).填寫登記本,,由負(fù)責(zé)人簽字,。
注意事項(xiàng):
1).流動(dòng)相均需色譜純度,水用20M的去離子水,。脫氣后的流動(dòng)相要小心振動(dòng)盡量不引起氣泡,。
2).柱子是非常脆弱的,**次做的方法,,先不要讓液體過柱子,。
3).所有過柱子的液體均需嚴(yán)格的過濾。
4).壓力不能太大,,**不要超過2000psi,。