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尼康生物顯微鏡使用與保養(yǎng)
閱讀：1841 發(fā)布時間：2020-7-24
一、尼康生物顯微鏡的使用
(一)使用環(huán)境與習(xí)慣
1,、使用環(huán)境
顯微鏡的工作場所應(yīng)當(dāng)清潔,、干燥、無震動,、無腐蝕性氣體存在,。
2、工作習(xí)慣
(1)臺面和凳子的高度要適當(dāng),。
(2)鏡檢時,，即便用單目顯微鏡,，也須兩眼同時睜開，用左眼觀察,。以便右眼繪圖或記錄,。如一只眼睜,，一只眼閉,，眼睛容易疲勞，無法久看,。工作時間較長時,，可兩眼輪流觀察。
(二)尼康生物顯微鏡使用前的準(zhǔn)備
1,、光學(xué)系統(tǒng)的安裝
對新購或已經(jīng)卸掉光學(xué)系統(tǒng)的顯微鏡,，使用前必須先將顯微鏡安裝起來。安裝時,，為了防止向下掉灰塵,，應(yīng)按照先上后下的順序，即按照目鏡,、物鏡,、聚光鏡、反射鏡的順序來安裝,。
安裝物鏡時,，應(yīng)先將鏡筒升高或載波物臺下降，使轉(zhuǎn)換器與載物臺之間保持一定的距離,。然后,，握往物鏡，把它放入轉(zhuǎn)換器的螺絲口處,，先略向反時針方向旋轉(zhuǎn),，待物鏡配上絲紋后，再按順時針方向旋入,，旋中等程度松緊即可,。安裝物鏡時，應(yīng)根據(jù)物鏡的放大倍數(shù),，從小到大順時針安裝,。轉(zhuǎn)換物鏡時，不要用手推著物鏡旋轉(zhuǎn),，那樣會使物鏡的光軸歪斜,。好用手捏著轉(zhuǎn)換器的轉(zhuǎn)動盤旋轉(zhuǎn)，或用手扶著與物鏡轉(zhuǎn)換器銜接處的滾花外圓旋轉(zhuǎn),。
目鏡和物鏡裝好后,，再將聚光鏡插入載物臺下面的聚光器支架內(nèi),。插入的高度應(yīng)使聚光器升高時，聚光鏡上透鏡的端面稍低于載物臺的平面,，以免載玻片與聚光器的鏡頭相碰,。然后，將聚光器的固定螺絲旋緊,。對非電光源的顯微鏡來說,，后要把反射鏡插入聚光器下面的插孔內(nèi)。
2,、校正光軸
校正光軸的意義在于使物鏡,、目鏡、聚光鏡的主光軸和可變光欄的中心點(diǎn)重合在一條直線上,。所以又叫做合軸調(diào)節(jié)或中心調(diào)節(jié),。如果光軸歪斜，會使像差增大,，分辨率和清晰度都要下降,。
檢查方法是將可變光欄開大，把低倍物鏡旋入光軸,，降低鏡筒,，使物鏡與載物臺之間的距離小于該物鏡的工作距離(5mm以下)。不放標(biāo)本,，調(diào)節(jié)反射鏡的角度,，使視場亮；或調(diào)節(jié)光源燈的亮度,，使視場明暗合適,。
然后，拔掉目鏡,，直接從鏡筒中觀察,。一邊把可變光欄慢慢縮小或打開數(shù)次，當(dāng)光欄關(guān)小時,，光欄的像(此時只有一點(diǎn)點(diǎn))應(yīng)正好落在物鏡通光孔的中心,。當(dāng)光欄開大到一定程度時，光欄孔的像應(yīng)正好與物鏡通光孔的黑圈相重合,。若符合上述兩個條件,，說明它們“合軸”。否則,，就需要調(diào)整,。
目鏡和物鏡都是固定的，無法進(jìn)行調(diào)整,。合軸調(diào)節(jié)主要是調(diào)整聚光鏡的位置,。有些顯微鏡聚光器支架兩旁有兩個光軸校正螺絲,，調(diào)節(jié)這兩個螺絲，即可合軸,。另一種聚光器是由框架上三個相隔120°的螺絲支持住,，其中一個裝有彈簧，可以伸縮,；另外兩個螺絲,，可以旋動。調(diào)整這兩個螺絲,，便可合軸,。
顯微鏡的光軸校正好后,，如果沒有拆下聚光器或其它特殊原因,，不必經(jīng)常校正。
3,、準(zhǔn)備好標(biāo)本
準(zhǔn)備好高質(zhì)量的標(biāo)本備用,。
(三)尼康生物顯微鏡反射鏡、聚光器的使用方法和對光方法
1,、調(diào)光
對采用反射鏡的的顯微鏡,，一般都使用平面反射鏡去反射太陽的散射光。只有在光線不足或窗外有干擾時,，才使用凹面反射鏡,。
采用電光源的顯微鏡，將光亮調(diào)合適即行,。
2,、聚光器的用法
(1)聚光器高度的調(diào)節(jié) 一般的聚光鏡，在平行光照射的情況下,，其焦點(diǎn)落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm處,。當(dāng)使用高倍鏡或油鏡時，由于放大率大,，鏡像亮度小,，需要較強(qiáng)的照明。因此,，應(yīng)把聚光器升高,，以便使聚光鏡的焦點(diǎn)正好落在標(biāo)本平面上。但在使用低倍物鏡時,，可將聚光器適當(dāng)下降,。
(2)可變光欄的用法 可變光欄起兩個作用。一是控制射向標(biāo)本的光通量,；二是改變聚光器的數(shù)值孔徑,。在這兩個作用中,，后者是主要的。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用,，從原則上說,，聚光器的數(shù)值孔徑應(yīng)與物鏡的相同。否則,，分辨率或清晰度會受影響,。
3、對光方法
對電光源顯微鏡來說,，使用時,，只要將光調(diào)節(jié)在合適的亮度即行。不需要進(jìn)行對光,。但對使用自然光的低檔顯微鏡來說,，要想獲得良好的觀察效果，必須充分利用照明光線,。因此,，鏡檢之前應(yīng)先對光。對光時,，將低倍鏡旋入光軸,，聚光器適當(dāng)升高，可變光欄開大,。然后,，從目鏡中觀察，同時轉(zhuǎn)動反射鏡,，直視場明亮,、清晰為止。如果利用自然光,，則盡量躲避窗框和窗外樹枝的干擾,。
(四)物鏡的正確調(diào)焦
對光完成后或調(diào)節(jié)合適光亮后，升高鏡筒或降低載物臺,，將標(biāo)本玻片夾在移動器即標(biāo)本夾上,，并將欲檢查的部分移載物臺通光孔的中央，然后開始調(diào)焦,。
無論作何種檢查,，均應(yīng)從低倍鏡開始。調(diào)焦時,，先用粗動手輪將鏡筒下降,，使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小于該物鏡的工作距離(5mm以下)。為了避免物鏡壓在標(biāo)本玻片上,，可從側(cè)面窺視,。然后,，一邊從目鏡中觀察視野，一邊利用粗動手輪將鏡筒徐徐上升,，待初見物像后,，改用微動手輪作精細(xì)調(diào)焦，直物像清晰為,。低倍物鏡的視場大,，有利于觀察標(biāo)本的全貌。也可利用移動器或縱,、橫向調(diào)節(jié)手輪尋覓所觀察的目標(biāo),。如有必要，可將尋得的目標(biāo)移視場的中心,，為高倍鏡觀察作好準(zhǔn)備,。
從低倍物鏡轉(zhuǎn)換為高倍物鏡時，如果物鏡是顯微鏡的原配,，所用的載玻片,、蓋玻片又符合標(biāo)準(zhǔn)，一般都可以進(jìn)行“等高轉(zhuǎn)換”,。即轉(zhuǎn)換后，只要稍微調(diào)節(jié)一下微調(diào)旋鈕,，即可看到清晰的圖像,。但油鏡不強(qiáng)求齊焦，好先將鏡筒升高后再轉(zhuǎn)換,，后按低倍鏡的調(diào)焦方法重新調(diào)焦,。
使用油鏡的方法如下：先將鏡筒升高，取下標(biāo)本玻片,，稍稍降低聚光器,，并在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油(油中不應(yīng)有氣泡。如有,，可用小木簽除去),，再將標(biāo)本玻片放回原處，把聚光器升高,，使載玻片的底面與香柏油接觸,。這樣，就完成了聚光鏡的油浸,。接著,，在蓋玻片上滴上1滴香柏油。然后從側(cè)面窺視,，利用粗調(diào)使鏡筒盡量下降,，直油鏡的前透鏡浸沒在香柏油中(但尚未接觸玻片),，這樣，又完成了物鏡的油浸,。然后,，一邊從目鏡中觀察，一邊利用微動手輪將鏡筒緩緩上升(注意不要擰錯了方向,，壓碎蓋玻片),，直視野中出現(xiàn)清晰的物像為止。
聚光鏡的油浸,，還可以采用另一種滴油方法：即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上,，而是把載玻片翻過來，將油滴在載玻片的底面上,，然后再翻過去,，對準(zhǔn)放置于聚光器上面，再使聚光器上升,，來完成聚光器的油浸,。這種方法雖然不那么順手，但比較安全,。有些人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來涂抹香柏油,，這種方法容易劃傷鏡片，不宜采用,。
在使用油鏡時,，允許在聚光鏡與標(biāo)本之間不加香柏油，即聚光鏡上仍以空氣為介質(zhì),，但這會犧牲物鏡的分辨率,。
如用油鏡觀察后，如又需要轉(zhuǎn)回高倍物鏡觀察,，應(yīng)將蓋玻片上的油擦去,，以免沾污高倍物鏡。但聚光器上的油可以不擦,，只要把光欄適當(dāng)縮小一點(diǎn)即可,。
油鏡使用完畢后，要及時將香柏油擦拭干凈,。鏡頭上可先用干凈的擦鏡紙擦1——2次,，把大部分的油擦掉。然后用二甲苯滴濕的擦鏡紙擦兩次,，后用擦鏡紙擦干凈即行,。聚光鏡的擦拭方法與此相同。如標(biāo)本需要保存，玻片上的香柏油可用“拉紙法”擦拭干凈,。即將擦鏡紙復(fù)蓋在玻片上,，在紙上滴上一滴二甲苯，趁濕將紙條平拖著往外拉,，連續(xù)幾次即可擦干凈,。
后指出：在整個調(diào)焦過程中(尤其是高倍物鏡和油鏡的調(diào)焦)，每個動作都要緩慢進(jìn)行,。否則,，物像會一閃而過，找不到觀察的目標(biāo),。