紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的校準(zhǔn)主要是通過(guò)對(duì)一些有數(shù)值型的技術(shù)指標(biāo)測(cè)試來(lái)進(jìn)行,。如波長(zhǎng)準(zhǔn)確度、波長(zhǎng)重復(fù)性,、光譜帶寬,、雜散光、分辨率,、透射比誤差,、透射比重復(fù)性、噪聲,、基線平直性等,，這里主要介紹波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和波長(zhǎng)重復(fù)佳、透射比準(zhǔn)確度和透射比重復(fù)性兩個(gè)項(xiàng)目校準(zhǔn)的具體儀器條件或校準(zhǔn)步驟,。

　?、俨ㄩL(zhǎng)準(zhǔn)確度和波長(zhǎng)重復(fù)性  若儀器能夠放置低壓汞燈的，按照檢定規(guī)程低壓汞燈進(jìn)行全波長(zhǎng)測(cè)試,，否則可用儀器固有的氘灼測(cè)試,，取單束光能量方式，掃描速度15nm/min,，響應(yīng)快,，小帶寬0.1nm，量程0～100%,，對(duì)486. 02nm和656. 10nm兩個(gè)單峰進(jìn)行單方向重復(fù)掃描3次,，測(cè)量出譜圖上的2條譜線波長(zhǎng)，波長(zhǎng)測(cè)量的平均值與波長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)值之差就是波長(zhǎng)準(zhǔn)確度,，測(cè)量波長(zhǎng)的大值與小值之差就是波長(zhǎng)重復(fù)性,。

　　②透射比準(zhǔn)確度和透射比重復(fù)性  取帶寬2nm,，用1套標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池分別裝空白溶液和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0．006000%的重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液,，在35nm，257nm,313nm,，350nm四個(gè)波長(zhǎng)處連續(xù)3次測(cè)量透射比,，與檢定規(guī)程中附帶的標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行比較，測(cè)量平均值與標(biāo)準(zhǔn)值之差就是透射比準(zhǔn)確度,，測(cè)量值的大值與小值之差就是透射比重復(fù)性,。

　　影響紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度的主要因素有以下幾個(gè)方面：

　　①儀器的雜散光,。

　?、趦x器的光度噪聲,。

　　③儀器的基線平直度,。

　?、軆x器的光譜帶寬。不同的光譜帶寬分析誤差不同,；不同試樣有不同的*分析測(cè)試光譜帶寬,。

　　⑤波長(zhǎng)準(zhǔn)確度,。對(duì)同一物質(zhì),，不同的波長(zhǎng)有不同的摩爾吸光系數(shù)，即不同的靈敏度,。

　?、拊嚇拥膩?lái)源，包括樣品的制備和取樣的方法（如稱量,、容量,、溶劑、試劑,、pH值,、時(shí)間、溫度等）,。

　?、弑壬蟮男阅埽ū壬蟮募庸ふ`差,、比色皿的配對(duì),、比色皿的玷污等。

　　由此可知,，光度準(zhǔn)確度是一個(gè)綜合性的性能技術(shù)指標(biāo),。要使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)得準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)，必須注意上述幾個(gè)方面的影響,。特別是在分析測(cè)試時(shí),，如何選擇（或設(shè)定）這些技術(shù)指標(biāo)是非常重要的。應(yīng)該指出的是,，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在同時(shí)給出吸光度誤差和透射比誤差時(shí),，兩者不能相互矛盾。