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Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks),，產(chǎn)品型號：IGY-1910,。

Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)，

儲藏條件

所有試劑在 4oC 下可穩(wěn)定保存長達 1 年。

一般建議

1. 雞蛋可在 4°C 下長期保存,，但建議在使用本試劑盒分離 IgY 之前將雞蛋打碎,。分離后的蛋黃可在 4°C 的 0.05% 中儲存數(shù)天，而 IgY 回收率不會有任何明顯損失,。不應將蛋黃冷凍儲存以用于此試劑盒,。

2. 蛋黃中的脂質含量差異很大，有時破損步驟不會產(chǎn)生清澈的上清液,。在這種情況下,，可以添加更多體積的試劑 A 以破壞蛋黃。

IgY 純化試劑盒 - 如何從蛋黃中純化 IgY 抗體

IGY 的分離和純化步驟很簡單,，在室溫下進行,。

1. 使用蛋黃分離器將新鮮雞蛋打碎并分離蛋黃。蛋黃被刺破釋放出蛋黃內容物,，可以使用牙簽輕松去除膜,。

2. 對于新鮮蛋黃，在持續(xù)攪拌下加入 5 倍體積的試劑 A 的蛋黃重量,。注意：如果蛋黃放置 3 天或以上且未冷凍,，建議使用 6 倍體積的試劑 A。不建議使用此試劑盒使用冷凍蛋黃,。

3. 加入所有試劑后,，會形成濃稠的黃色沉淀。繼續(xù)攪拌 10 分鐘,，并將內容物在 4 ° C 下孵育過夜,。沉淀物將沉淀下來,，1-2 小時內可以看到澄清的上清液。

4. 將內容物在冷搖擺式離心機中于 4 ° C以 3500-4000Xg 離心 30 分鐘,。

5. 將澄清的上清液倒入預冷的燒杯中,，并在不斷攪拌下緩慢加入等體積的試劑 B。繼續(xù)攪拌 10 分鐘,，并將混合物在 4 ° C 下放置 2-4 小時至過夜,。1-2 小時內，底部會出現(xiàn)透明的白色沉淀物,。

6. 將內容物在 4°C 下以 4000xg 離心 20 分鐘以收集白色沉淀物,。

7. 小心去除所有液體，并使用以下公式在抗體重組緩沖液中重組白色顆粒,。對于 10 克蛋黃,，添加 2 至 2.5 毫升的抗體重組緩沖液。

8. 通過在 280 處測量 1:20 稀釋的 OD,，按內容量化 IgY,。

9. 總 IgY 可按 1:1 的比例保存在抗體穩(wěn)定緩沖液中，可在 -40°C 或以下長期保存,。

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