MagVigen™ – anti CD4, Human Nanoparticles
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mag vigen–抗CD4磁性納米顆粒是快速分離或清除人類(lèi)CD4的理想選擇+祖干細(xì)胞,。涂有抗CD4單克隆抗體的MagVigen磁性納米顆??勺R(shí)別并有效結(jié)合CD4+短時(shí)間培養(yǎng)后的細(xì)胞,。納米顆粒結(jié)合CD4+細(xì)胞可以用磁鐵從樣品的其余部分分離出來(lái),。
magvigen-anti-CD4提供了高純度和高活性細(xì)胞的高回收率,,可用于進(jìn)一步的下游分子檢測(cè)。珠子結(jié)合的細(xì)胞可以被裂解用于進(jìn)一步的蛋白質(zhì)或核酸分析,。MagVigen納米顆粒比傳統(tǒng)微珠小得多,。該特征允許納米顆粒更好地接近細(xì)胞表面的抗原表位。此外,,MagVigen納米顆粒的表面經(jīng)過(guò)涂層,,可減少與非靶向CD4陰性細(xì)胞的非特異性相互作用。
產(chǎn)品內(nèi)容
- mag vigen–抗CD4磁性納米顆粒溶于1ml pH 7.4的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中,。
物種反應(yīng)性:人類(lèi),。其他未測(cè)試。
Cat# K51003還包括:
所有材料應(yīng)儲(chǔ)存在4°c下,。
保質(zhì)期:6個(gè)月
方案:Deplete or positively isolate CD4+ cells
- 用等體積的PBS +2mM EDTA稀釋血液。
- 在50毫升錐形離心管中的Ficoll-Hypaque溶液上緩慢分層稀釋的血液,。每1毫升血液使用2毫升Ficoll-Hypaque(不含,,由適馬·奧爾德里奇公司生產(chǎn))。
- 室溫下400g離心40分鐘,,無(wú)制動(dòng),。
- 收集位于血漿和Ficoll-Hypaque界面的單核細(xì)胞,,并轉(zhuǎn)移至15-ml錐形管中。
- 用4倍體積的冷PBS稀釋吸出的單核細(xì)胞,。
- 在4°C下以400g離心10分鐘,,棄去上清液,。
- 將1毫升外周血中的單核細(xì)胞重新懸浮在1毫升Ca中
2+
和Mg2+
補(bǔ)充有0.05% BSA和5 mM EDTA的游離PBS緩沖液,。
- 用200μl PBS緩沖液洗滌25μl MagVigen-CD4珠兩次,。重新分散在25μl PBS緩沖液中,。
- 向含有4-5百萬(wàn)個(gè)細(xì)胞的單核細(xì)胞溶液中加入預(yù)洗滌的珠子,,并在4℃下溫和旋轉(zhuǎn)孵育1-2小時(shí)。
- 用磁鐵將試管放置5分鐘,。
- 對(duì)于耗盡:將上清液轉(zhuǎn)移到新試管中以備后用,,并丟棄珠子。
- 對(duì)于陽(yáng)性隔離:當(dāng)試管仍在磁鐵中時(shí),小心地取出并丟棄上清液,。
- 再次重復(fù)上述洗滌步驟。
- 在200μl PBS緩沖液中洗滌珠結(jié)合的細(xì)胞,并如上沉淀珠結(jié)合的細(xì)胞,。
- 將分離的細(xì)胞重新懸浮在PBS或優(yōu)選的細(xì)胞培養(yǎng)基中,,以進(jìn)一步用于下游應(yīng)用,。
MagVigen™ – anti CD4, Human Nanoparticles