由Porath（1）開發(fā)的固定化金屬離子親和色譜（IMAC）基于某些蛋白質(zhì)殘基（組氨酸、半胱氨酸以及一定程度的色氨酸）與過渡金屬陽離子的相互作用,。
鈷螯合樹脂專門設(shè)計(jì)用于純化與鈷離子相關(guān)的蛋白質(zhì),，包括6x組氨酸標(biāo)記的蛋白質(zhì),。盡管6 X His標(biāo)簽蛋白的結(jié)合效率略低于鎳螯合樹脂非特異性結(jié)合顯著減少。鈷樹脂對多聚His序列具有較高的選擇性,，但是具有較低的裝載能力,，因此鈷螯合樹脂應(yīng)該用于有價值的重組蛋白。
利用鈷（Co2+）用于6x組氨酸標(biāo)簽蛋白的純化,。
這種樹脂結(jié)合六個組氨酸殘基（6x His），這是蛋白質(zhì)純化中常用的標(biāo)簽,。該樹脂由與6%交聯(lián)瓊脂糖珠偶聯(lián)的亞氨基二乙酸酯組成,。亞氨基二乙酸鹽結(jié)合二價鈷離子的容量為20-40 μm ol Co2+/毫升樹脂。蛋白質(zhì)結(jié)合能力大于每毫升樹脂50毫克蛋白質(zhì),。我們已經(jīng)證明了超過100毫克的50kDa 6XHis標(biāo)簽蛋白與1毫升樹脂的結(jié)合,。
旋轉(zhuǎn)柱的樹脂床體積為0.2、1和3毫升,，總柱體積分別為1、8和22毫升,。色譜柱可用作重力流色譜柱的旋轉(zhuǎn)格式,。
使固定鎳,銅和鋅螯合樹脂也是可用的。鈷的選擇性最高,，其次是鋅,、鎳和銅，但負(fù)載能力低,。銅的負(fù)載能力最高,，其次是鎳，然后是鋅,。
特殊的裝訂/清洗和洗脫緩沖區(qū)可用。
我們新的HOOK 6X His蛋白純化試劑盒現(xiàn)已上市,，包括從酵母或細(xì)菌中純化6X His標(biāo)簽蛋白所需的一切,，包括裂解緩沖液、裂解酶,、樹脂,、色譜柱以及結(jié)合、清洗和洗脫緩沖液,。每個套件都配有鎳或鈷螯合樹脂,。可用的套件有:
HOOK 6X His蛋白質(zhì)純化（細(xì)菌）:與細(xì)菌隔離,；經(jīng)過優(yōu)化,，可獲得高達(dá)10毫克/250毫升的可溶性6X His標(biāo)簽蛋白培養(yǎng)物。
HOOK 6X His蛋白質(zhì)旋轉(zhuǎn)純化（細(xì)菌）:與細(xì)菌隔離,；優(yōu)化后可獲得約1毫克/50毫升的可溶性6X His標(biāo)簽蛋白培養(yǎng)物
HOOK 6X His蛋白質(zhì)純化（酵母）:從酵母中分離,；優(yōu)化后可產(chǎn)生高達(dá)10毫克的可溶性6X His標(biāo)簽蛋白,。
HOOK 6X His蛋白質(zhì)旋轉(zhuǎn)純化（酵母）:從酵母中分離,；優(yōu)化后可產(chǎn)生高達(dá)1毫克的可溶性6X His標(biāo)簽蛋白。
特征
- For the purification of Cobalt Binding proteins, including 6x His proteins
- High capacity: >50mg/ml
- Ligand density: 20-40μmoles Co
2+
/ml resin - Bead Structure: 6% cross-linked agarose
應(yīng)用程序
- 鈷結(jié)合蛋白的親和純化
- 具有6x His標(biāo)簽的蛋白質(zhì)親和純化。
G-Biosciences公司位于美國圣路易斯州。公司以生產(chǎn)核酸與分子生物學(xué)產(chǎn)品起家,。隨著蛋白組學(xué)和功能基因組學(xué)時代的到來,，公司將開發(fā)的重點(diǎn)轉(zhuǎn)向蛋白質(zhì)組學(xué)研究，現(xiàn)已形成了*的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品線,，并且形成了新的子品牌G-biosciences,，依靠強(qiáng)大的研發(fā)能力和創(chuàng)新精神，G-Biosciences的團(tuán)隊(duì)檢查了特定實(shí)驗(yàn)技術(shù)的每個方面,，從蛋白質(zhì)提取到蛋白質(zhì)純化和檢測,，以確定我們可以改進(jìn)的關(guān)鍵領(lǐng)域。因此,，我們現(xiàn)在可以生產(chǎn)各種產(chǎn)品,，從濃度和大小合適的簡單緩沖液到定制設(shè)備（如試管透析器），從而增強(qiáng)和簡化關(guān)鍵技術(shù),。我們關(guān)注的關(guān)鍵領(lǐng)域包括但不限于蛋白質(zhì)分析,、樣品制備、電泳,、蛋白質(zhì)印跡,、質(zhì)譜、分析開發(fā),、抗體生產(chǎn)和蛋白質(zhì)純化,。 產(chǎn)品在大量的科技文獻(xiàn)中被引用,，是當(dāng)之無愧的ProteinMan。
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