由Porath（1975年）開(kāi)發(fā)的固定化金屬離子親和色譜（IMAC）基于某些蛋白質(zhì)殘基（組氨酸、半胱氨酸以及一定程度的色氨酸）與過(guò)渡金屬陽(yáng)離子的相互作用,。
Co-NTA樹(shù)脂專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于純化在細(xì)菌,、昆蟲(chóng)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的融合到6 x組氨酸（6XHis）標(biāo)簽的重組蛋白。該樹(shù)脂對(duì)標(biāo)記有六個(gè)串聯(lián)組氨酸殘基的重組融合蛋白具有高親和力和選擇性,。盡管與鎳螯合樹(shù)脂相比,，6X His標(biāo)簽蛋白的結(jié)合效率較低，但非特異性結(jié)合顯著減少,。
共NTA樹(shù)脂可用于在天然和變性條件下純化6X His標(biāo)簽蛋白,。與樹(shù)脂結(jié)合的蛋白質(zhì)可以用低pH緩沖液或咪唑或組氨酸競(jìng)爭(zhēng)洗脫,。
Co-NTA樹(shù)脂在高度交聯(lián)的6%瓊脂糖基質(zhì)中使用氮三乙酸（NTA），一種四價(jià)螯合配體,。NTA通過(guò)四個(gè)配位位置結(jié)合Co2+離子,。
這種樹(shù)脂的二氧化碳容量為20-40微摩爾2+/毫升樹(shù)脂。蛋白質(zhì)結(jié)合能力大于每毫升樹(shù)脂50毫克蛋白質(zhì),。我們已經(jīng)證明了超過(guò)100毫克的50kDa 6XHis標(biāo)簽蛋白與1毫升樹(shù)脂的結(jié)合,。
旋轉(zhuǎn)柱的樹(shù)脂床體積為0.2、1和3毫升,，總柱體積分別為1,、8和22毫升。色譜柱可用作重力流色譜柱的旋轉(zhuǎn)格式,。
還提供96孔旋轉(zhuǎn)板格式,，最多可處理96個(gè)樣品,。
固定化伊達(dá)鎳,銅,鈷和鋅和尼-NTA螯合樹(shù)脂也是可用的,。鈷的選擇性最高,，其次是鋅、鎳和銅,，但負(fù)載能力低,。銅的負(fù)載能力最高，其次是鎳,，然后是鋅,。
特殊的裝訂/清洗和洗脫緩沖區(qū)可用,。
我們新的HOOK 6X His蛋白純化試劑盒現(xiàn)已上市,，包括從酵母或細(xì)菌中純化6X His標(biāo)簽蛋白所需的一切，包括裂解緩沖液、裂解酶,、樹(shù)脂,、色譜柱以及結(jié)合、清洗和洗脫緩沖液,。每個(gè)套件都配有鎳或鈷螯合樹(shù)脂,。可用的套件有:
HOOK 6X His蛋白質(zhì)純化（細(xì)菌）:與細(xì)菌隔離,；經(jīng)過(guò)優(yōu)化,，可獲得高達(dá)10毫克/250毫升的可溶性6X His標(biāo)簽蛋白培養(yǎng)物。
HOOK 6X His蛋白質(zhì)旋轉(zhuǎn)純化（細(xì)菌）:與細(xì)菌隔離,；優(yōu)化后可獲得約1毫克/50毫升的可溶性6X His標(biāo)簽蛋白培養(yǎng)物
HOOK 6X His蛋白質(zhì)純化（酵母）:從酵母中分離,；優(yōu)化后可產(chǎn)生高達(dá)10毫克的可溶性6X His標(biāo)簽蛋白。
HOOK 6X His蛋白質(zhì)旋轉(zhuǎn)純化（酵母）:從酵母中分離；優(yōu)化后可產(chǎn)生高達(dá)1毫克的可溶性6X His標(biāo)簽蛋白,。
特征
- Uses nitrilotriacetic acid (NTA), a tetradenate chelating ligand
- For the purification of 6x His proteins
- High capacity: >50mg/ml
- Ligand density: 20-40μmoles Co
2+
/ml resin - Bead Structure: 6% cross-linked agarose
應(yīng)用程序
G-Biosciences公司位于美國(guó)圣路易斯州,。公司以生產(chǎn)核酸與分子生物學(xué)產(chǎn)品起家。隨著蛋白組學(xué)和功能基因組學(xué)時(shí)代的到來(lái),，公司將開(kāi)發(fā)的重點(diǎn)轉(zhuǎn)向蛋白質(zhì)組學(xué)研究,，現(xiàn)已形成了*的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品線，并且形成了新的子品牌G-biosciences,，依靠強(qiáng)大的研發(fā)能力和創(chuàng)新精神,，G-Biosciences的團(tuán)隊(duì)檢查了特定實(shí)驗(yàn)技術(shù)的每個(gè)方面，從蛋白質(zhì)提取到蛋白質(zhì)純化和檢測(cè)，以確定我們可以改進(jìn)的關(guān)鍵領(lǐng)域,。因此,，我們現(xiàn)在可以生產(chǎn)各種產(chǎn)品，從濃度和大小合適的簡(jiǎn)單緩沖液到定制設(shè)備（如試管透析器）,，從而增強(qiáng)和簡(jiǎn)化關(guān)鍵技術(shù),。我們關(guān)注的關(guān)鍵領(lǐng)域包括但不限于蛋白質(zhì)分析,、樣品制備,、電泳、蛋白質(zhì)印跡,、質(zhì)譜,、分析開(kāi)發(fā)、抗體生產(chǎn)和蛋白質(zhì)純化,。 產(chǎn)品在大量的科技文獻(xiàn)中被引用,，是當(dāng)之無(wú)愧的ProteinMan。
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