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血糖含量測試盒
微量法 100管/96樣
正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
哺乳動(dòng)物血液中的葡萄糖稱為血糖,是其體內(nèi)糖的主要運(yùn)輸形式,。血糖濃度受神經(jīng)系統(tǒng)和激素的調(diào)節(jié)而保持相對穩(wěn)定,,調(diào)節(jié)失衡時(shí)出現(xiàn)高血糖和低血糖。糖尿病,、顱內(nèi)壓增加和脫水癥等均可引起高血糖,;飯后,精神緊張也可出現(xiàn)生理性高血糖,。相反,,胰島β細(xì)胞增生或腫癌等,垂體,、腎上腺皮質(zhì)和甲狀腺功能減退,,以及嚴(yán)重肝病患者均可出現(xiàn)低血糖癥狀。此外,,饑餓和劇烈運(yùn)動(dòng)可引起暫時(shí)的低血糖,。
測定原理:
葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫,;過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替比林偶聯(lián)酚,,生成有色化合物,,在505nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、水浴鍋,、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板,、蒸餾水,。
試劑的組成和配制:
試劑一:0.5μmol/mL葡萄糖溶液10mL×1瓶,4℃保存,;
試劑二:液體 10ml×1瓶,,4℃保存;
試劑三:液體 10ml×1瓶,,4℃保存,;(若出現(xiàn)結(jié)冰現(xiàn)象,可37℃水浴溶解后使用)
測定步驟:
1,、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長至505nm,蒸餾水調(diào)零,。
2,、混合試劑的配制:使用前將試劑二和試劑三1:1等體積混合,用多少配多少,。
3,、加樣表(在EP管或96孔板中加入下列試劑):
試劑(μL) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測定管 |
樣本 | 20 | ||
試劑一 | 20 | ||
蒸餾水 | 20 | ||
混合試劑 | 180 | 180 | 180 |
混勻,置37℃(哺乳動(dòng)物)或25'C(其它物種)保溫15min后,,于505nm波長處讀取吸光度,。空白管,、標(biāo)準(zhǔn)管和測定管吸光值分別記為A1,、A2和A3??瞻坠芎蜆?biāo)準(zhǔn)管只要做一管。
血糖含量計(jì)算:
血糖含量(μmol/mL)= C標(biāo)準(zhǔn)×(A3-A1)÷(A2-A1)=0.5×(A3-A1)÷(A2-A1)
C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)管濃度,,0.5µmol/mL,。
注意:
1、*低檢測限為1nmol/mL,。
2,、若樣本中存在葡萄糖氧化酶抑制劑,則會(huì)造成測定結(jié)果偏低,,建議改用HPLC法測定,。
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血糖含量測試盒
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