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植酸含量測(cè)試盒 

微量法 100管/96樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

植酸又稱肌酸,、環(huán)己六醇六全-二氫磷酸鹽,，它主要存在于植物的種子、根干和莖中,，其中以豆科植物的種子,、谷物的麩皮和胚芽中含量最高。植酸作為螯合劑,、抗氧化劑,、保鮮劑、水的軟化劑,、發(fā)酵促進(jìn)劑,、金屬防腐蝕劑等，廣泛應(yīng)用于食品,、醫(yī)藥,、油漆涂料、日用化工,、金屬加工,、紡織工業(yè),、塑料工業(yè)及高分子工業(yè)等行業(yè)領(lǐng)域。

測(cè)定原理：

磺基水楊酸-氯化鐵溶液顯紫紅色,，在500nm下有最大吸光值,。在pH6.0-6.5的環(huán)境下,，植酸和鐵離子結(jié)合使溶液顏色變淡,，測(cè)定吸光度的降低來(lái)檢測(cè)植酸含量。

所需的儀器和用品：

酶標(biāo)儀,、烘箱,、水浴鍋、可調(diào)式移液器,、96孔板,、金屬震蕩儀、蒸餾水

試劑的組成和配制：

試劑一：100ml×1瓶,，4℃保存,；

試劑二：50mL×1瓶，4℃保存,；

試劑三：100mL×1瓶,，4℃保存；

試劑四：6mL×1瓶,，4℃保存,。

植酸提取：

樣本烘干,，粉碎過(guò)篩,，稱取0.05g，加入1mL試劑一,，震蕩提取2h,；8000g，25℃離心10min,，取上清0.5mL,，加入0.5mL試劑二，混勻后4℃靜置2h,，離心取上清待測(cè),。

測(cè)定步驟

1、酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至500nm,。

2、測(cè)定管：取100μL上清,，加入900μL試劑三,，混勻后取150μL加入96孔板,，再加入50μL試劑四，充分混勻后500nm下測(cè)定吸光值A(chǔ)1,。

3,、空白管：取100μL蒸餾水，加入900μL試劑三,，混勻后取150μL加入96孔板,，再加入50μL試劑四，充分混勻后500nm下測(cè)定吸光值A(chǔ)2,。計(jì)算ΔA=A2-A1,。

空白管只要做一管。

植酸含量計(jì)算：

標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的回歸曲線為：y = 2.0284x + 0.0096,，R2 = 0.993,；X為植酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y為吸光值ΔA(A2-A1),。

植酸含量(mg/g干重)=（ΔA-0.0096）÷ 2.0284×V反總÷V樣÷(W÷V樣總)

                        =9.86×（ΔA-0.0096）÷W

V反總：測(cè)定液總體積,，1mL；V樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積,，0.1mL,； V樣總：加入提取液總體積，2mL,；W：樣本干重,，g。

注意事項(xiàng)：

若ΔA高于0.2,，說(shuō)明樣本植酸濃度過(guò)高,，需要加蒸餾水適當(dāng)稀釋，并在計(jì)算結(jié)果中乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)

上海牧榮生物科技有限公司

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