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更新時(shí)間:2024-05-07 14:21:52瀏覽次數(shù):418評(píng)價(jià)
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植物硝態(tài)氮測(cè)試盒
微量法100T/96S
注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定,。
測(cè)定意義
硝態(tài)氮是植物最主要的氮源,。植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量反映了土壤中硝態(tài)氮的供應(yīng)情況,,可作為土壤氮肥的指標(biāo),。測(cè)定植物體內(nèi)的硝態(tài)氮含量,,不僅能夠反映出植物的氮素營養(yǎng)情況,而且對(duì)鑒定蔬菜和以植物為原料的加工制品的品質(zhì)也有重要的意義,。
測(cè)定原理
在濃酸條件下,,NO3-與水楊酸反應(yīng),生成硝基水楊酸,,硝基水楊酸在堿性條件下(PH>12)呈黃色,,在一定范圍內(nèi),其顏色深淺與含量成正比,,可比色測(cè)定計(jì)算得硝態(tài)氮含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
蒸餾水,、天平,、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板,、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制
試劑一:粉劑×2支,,4℃避光保存,。臨用前根據(jù)用量每瓶加1.2mL濃硫酸充分溶解。
試劑二:液體60mL×1瓶,,4℃保存,。
試劑三:粉劑×1支,4℃保存,。
樣本處理
按照質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,,加入1mL蒸餾水)加入蒸餾水,室溫勻漿后置于90℃恒溫水浴鍋中浸提30min,,期間不斷晃動(dòng)或者置于90℃恒溫?fù)u床中振蕩提取30min,,待冷卻后于25℃,12000g離心15min,取上清待測(cè),。(深色植物勻漿后加入約3mg試劑三后再提?。?/p>
測(cè)定操作表
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至410nm,,蒸餾水調(diào)零,。
在EP管中如下表加樣
空白管 | 測(cè)定管 | |
樣本(μL) | 10 | |
蒸餾水(μL) | 10 | |
試劑一(μL) | 20 | 20 |
充分混勻,25℃靜置30min | ||
試劑二(μL) | 475 | 475 |
混勻,,渦旋振蕩,,使出現(xiàn)的沉淀充分溶解,轉(zhuǎn)移200uL至微量石英比色皿/96孔板中測(cè)定410nm處吸光值A(chǔ),,△A=A測(cè)定管-A空白管 |
注意:空白管只需測(cè)定一次,。
計(jì)算公式
用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0156x+0.0073,R2=0.9997
NO3—— N含量(mg/kg鮮重)=(△A-0.0073)÷ 0.0156÷(W÷V樣總)
=64.1×(△A-0.0073)÷W
V樣總:加入提取液體積,,1mL,,W:樣本質(zhì)量,g
用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0078x+0.0073,,R2=0.9997
NO3—— N(mg/kg鮮重)=(△A-0.0073)÷ 0.0078÷(W÷V樣總)
=128.2×(△A-0.0073)÷W
V樣總:加入提取液體積,,1mL,W:樣本質(zhì)量,,g
注意事項(xiàng)
試劑一配制好后盡快使用,,4℃可保存一周。
試劑一和試劑二均具有強(qiáng)腐蝕性,,操作時(shí)需做好防護(hù)措施,。
*低檢出限為2μg/g。
上海牧榮生物科技有限公司
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植物硝態(tài)氮測(cè)試盒
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