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植物可溶性糖含量測試盒

微量法 100管/96樣

正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì),?？扇苄蕴鞘侵笜悠分械倪€原單糖及在本法測定條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉,。

測定原理：

蒽酮比色法,。可用于可溶性單糖,、寡糖和多糖的含量測定,，具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優(yōu)點(diǎn)。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、沸水浴,、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板,、濃硫酸（不允許快遞）研缽,、和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

試劑一：粉劑×1瓶,，4℃避光保存,；
試劑二：10mL×1瓶 ,，4℃保存；

樣品中可溶性糖的提?。?/p>

稱取0.1~0.2g樣本,，加入1mL蒸餾水研磨成勻漿，倒入有蓋離心管中,，95℃水浴10min（蓋緊,，以防止水分散失），冷卻后,，8000g,，25℃離心10min，取上清液于10ml試管中,，用蒸餾水定容至10mL,，搖勻備用。

測定步驟

1,、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至620nm，蒸餾水調(diào)零,。

2,、調(diào)節(jié)水浴鍋至95度。

3,、工作液的配制：在試劑一中加入2.5mL試劑二,。充分溶解后使用，如較難溶解,，可加熱攪拌,；用不完的試劑4℃保存一周；

4,、加樣表（在EP管中反應(yīng)）：

混勻，置95度水浴中10min（蓋緊,，以防止水分散失）,，冷卻至室溫后，取200 uL轉(zhuǎn)移至微量石英比色皿或96孔板中,，于620nm處,，分別讀取空白管和測定管吸光值，ΔA=A測定管-A空白管,。

注意：1,、空白管只要做一管。

      2,、如果ΔA大于1,，需要將樣本用蒸餾水稀釋,，計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

3,、由于濃硫酸具有強(qiáng)腐蝕性,，請謹(jǐn)慎操作。

可溶性糖含量計(jì)算：

a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

1,、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 8.55x - 0.07,；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y為吸光值,。

2,、按樣本鮮重計(jì)算：

可溶性糖（mg /g鮮重）= [(ΔA＋0.07) ÷8.55×V1]÷（W×V1÷V2）=1.17×(ΔA＋0.07) ÷W。

3,、按樣本蛋白濃度計(jì)算：

可溶性糖（mg /mg prot）=[ (ΔA＋0.07) ÷8.55×V1]÷(V1×Cpr)=0.117×(ΔA＋0.07) ÷Cpr,。

V1：加入樣本體積，0.04mL,；V2：加入提取液體積,，10mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；W：樣本鮮重，g,。

b.用96孔板測定的計(jì)算公式如下

1,、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 4.275x - 0.07；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL）,，y為吸光值,。

2、按樣本鮮重計(jì)算：

可溶性糖（mg /g鮮重）= [(ΔA＋0.07) ÷4.275×V1]÷（W×V1÷V2）=2.34×(ΔA＋0.07) ÷W,。

3,、按樣本蛋白濃度計(jì)算：

可溶性糖（mg /mg prot）= [(ΔA＋0.07) ÷4.275×V1]÷(V1×Cpr)=0.234×(ΔA＋0.07) ÷Cpr。

V1：加入樣本體積,，0.04mL,；V2：加入提取液體積，10mL,； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL；W：樣本鮮重,，g,。

注意：*低檢測限為1mg/g鮮重或10ng/ mg prot

上海牧榮生物科技有限公司

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