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果糖含量測試盒

微量法 100管/96樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

果糖是一種最為常見的己酮糖,，是葡萄糖的同分異構(gòu)體,，以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中，能與葡萄糖結(jié)合生成蔗糖,。果糖是最甜的單糖,，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥,、保健品生產(chǎn)中,。

測定原理：

果糖與間苯二酚反應(yīng)，生成有色物質(zhì),，在480nm下有特征吸收峰。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標(biāo)儀,、水浴鍋,、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板,、研缽,、蒸餾水

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100ml×1瓶，4℃保存,；

試劑一：1mg/mL標(biāo)準(zhǔn)液10mL×1瓶,，4℃保存；

試劑二：液體 25ml×1瓶,，4℃保存,；

試劑三：液體 8ml×1瓶， 4℃避光保存,；

試劑四：粉劑0.5g×1瓶,，常溫保存。

果糖提?。?/p>

稱取0.1~0.2g樣本,，常溫研碎,；加入0.5mL提取液，適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中,；置于80℃水浴鍋中10min（蓋緊,，以防止水分散失），振蕩3~5次,，冷卻后,，4000g，25℃離心10min,，取上清,；加入少量（約2mg）試劑四，80℃脫色30min（蓋緊,，以防止水分散失）,；再加入0.5mL提取液，4000g,，25℃離心10min,，取上清液測定。

測定步驟

1. 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至480nm,，蒸餾水調(diào)零。

2. 樣本測定,，（在EP管中依次加入下列試劑）：

混勻,，95℃水浴反應(yīng)30min（蓋緊，以防止水分散失）,，冷卻后取200μL至微量石英比色皿或96孔板中測定480nm處光吸收值,，空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測定管分別記為A1,、A2和A3,。空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只要做一管,。

果糖含量計算：

1,、果糖含量(mg/mg prot）=（C標(biāo)準(zhǔn)管×V1）×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷（V1×Cpr）= (A3-A1)÷（A2-A1) ÷Cpr

此法需要自行測定蛋白濃度。

2,、果糖含量(mg/g鮮重)=(C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W,。

C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，1mg/mL,；V1：加入樣本體積,，0.03mL；V2：加入提取液體積,，1mL,； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL；W：樣本鮮重,，g,。

注意：*低檢測限為100ng/g鮮重或1ng/mg prot

上海牧榮生物科技有限公司

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