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多胺氧化酶(PAO)測試盒
  • 多胺氧化酶(PAO)測試盒
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更新時間:2024-05-07 13:33:55瀏覽次數(shù):452評價

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多胺氧化酶(PAO)測試盒 多胺氧化酶(Polyamine oxidase,,PAO)試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便,、快捷的服務,。

多胺氧化酶(PAO)測試盒

微量法 100管/96樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:                           

多胺氧化酶是催化生物體內(nèi)多胺氧化的關(guān)鍵酶,,通過調(diào)節(jié)體內(nèi)多胺水平和生成物的濃度,,參與各種植物體對逆境脅迫的反應和生長發(fā)育過程。

測定原理:

PAO催化多胺氧化產(chǎn)生過氧化氫,,在過氧化物酶存在的條件下與底物顯色,,在550nm下有特征吸收峰,,通過測定吸光值增加速率來反映PAO活性,。

需自備的儀器和用品:

酶標儀、臺式離心機,、可調(diào)式移液器,、96孔板,、研缽,、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體120mL×1瓶,,4℃保存,;

試劑二:液體3mL×1瓶,4℃保存;

試劑三:液體1.5mL×1瓶,,4℃保存,;

試劑四:液體1.5mL×1瓶,4℃保存,。

粗酶液提?。?/p>

組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,,然后10000g,,4℃離心20min,取上清,,置冰上待測,。

細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),,冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,,超聲3秒,間隔7秒,,總時間3min),;然后10000g,4℃,,離心10min,,取上清置于冰上待測。

血清等液體:直接測定,。

測定步驟:

  1. 酶標儀預熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長至550nm。

  2. 樣本測定

試劑名稱(µL)

測定管

試劑一

140

試劑二

20

試劑三

10

樣本

20

試劑四

10

迅速混勻,,于550nm下測定初始吸光值A1與30min后吸光值A2,。ΔA=A2-A1。

PAO活性計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位定義:每mg組織蛋白在每mL反應體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位,。

PAO(U/mg prot)=ΔA×V反總÷(V樣×Cpr)÷0.001÷T =333.33×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:

單位定義:每g組織在每mL反應體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位,。

PAO(U/g 鮮重)=ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.001÷T =333.33×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算:

單位定義:每1萬個細菌或細胞在每mL反應體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位。

PAO(U/104 cell)=ΔA×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷0.001÷T =0.667×ΔA

  1. 按液體體積計算

單位的定義:每mL液體樣本在每mL反應體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位,。

PAO(U/mL)=ΔA×V反總÷V樣÷0.001÷T =333.33×ΔA

V反總:反應體系總體積,,0.2mL;V樣:加入樣本體積,,0.02 mL,;V樣總:加入提取液體積,1 mL,;T:反應時間,,30 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,,g;500:細菌或細胞總數(shù),,500萬。

上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理,。

  2. 國外試劑的訂購,。可提供歐美實驗室品牌的采購方案,。

  3. 提供加急物流處理,,進口貨物,最快交期1-2周,。

  4. 進出口貨物代理服務,。

  5. 公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers,, cstti,,Click Chemistry tools,,Nanoprobes,Ancell,,NANOCS,,Ambeed, Inc,,SPEED BioSystems, LLC,,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

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  7. 公司突出創(chuàng)新思維,,提高工作效能,減低運作成本,,為客戶提供優(yōu)惠的價格,。

多胺氧化酶(PAO)測試盒





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