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核糖核酸酶T1/Rnase T1
英文名稱:Ribonulease T1 from Aspergillus oryzae,;Rnase T1
CAS號(hào):9026-12-4
級別:BR
分子量:11.2kDa,,單體
來源:大腸桿菌細(xì)胞含有米曲霉(Aspergillus oryzae)來源的克隆基因rntA
濃度:1000U/ul
活力定義:1個(gè)活性單位是指37℃,,pH7.5條件下,,酵母RNA溶解水解15分鐘使其260nm波長吸光值增加1.0所需的酶量
酶活性分析混合物:50mM Tris-HCL(PH7.5), 2mM EDTA, 3mg/ml酵母RNA
保存緩沖液組分:50mM Tris-HCL(PH7.4)和50%(v/v)甘油
質(zhì)量控制:相關(guān)測試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶,、蛋白酶污染,,功能檢測方法為質(zhì)粒DNA純化過程中的RNA降解(與RNase A協(xié)同作用)
抑制劑:金屬離子Mg2+、Ca2+,、Zn2+,、Fe2+,、Cu2+(MgCL2, 100mM濃度時(shí)抑制效率約40%,;CaCL2,10mM濃度時(shí)抑制效率約30%,;Zn2+,、Fe2+和Cu2+在1mM時(shí)抑制效果很強(qiáng))、單核苷酸(2-GMP,,3-GMP等),、guanilyl-2-5-鳥苷
失活:熱失活是可逆的,建議采用過柱純化或苯酚/氯仿抽提除去該酶
性狀:核糖核酸酶 T1是一種內(nèi)切酶,,在G殘基位點(diǎn)特異性降解單鏈RNA,。該酶通過形成核苷2′,3′-環(huán)磷酸中間體來切割3′-鳥苷殘基與鄰近核苷5′-OH基團(tuán)之間的磷酸二酯鍵,。反應(yīng)產(chǎn)物是3′-GMP末端寡核苷酸,。RNase T1發(fā)揮活性無需金屬離子參與
用途:生化研究。除去DNA抽取物中的RNA,;RNA測序,;核糖核酸酶保護(hù)分析,與RNase A協(xié)同作用,;除去重組蛋白抽提物中的RNA,;檢測G-less cassette DNA模板體外轉(zhuǎn)錄合成的RNA轉(zhuǎn)錄子水平
保存:-20℃
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核糖核酸酶T1/Rnase T1
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