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SAINT 試劑的儲(chǔ)存

我們所有的 SAINT 試劑均作為即用型轉(zhuǎn)染試劑在室溫下運(yùn)輸,。到達(dá)后，應(yīng)儲(chǔ)存在 4-7°C 下（不要冷凍）,。穩(wěn)定性研究表明,，SAINT 試劑在開(kāi)封后至少可穩(wěn)定一年。

我將 SAINT 試劑存放在冰箱中,。我還能使用它嗎?

是的,！解凍后，SAINT 試劑可能會(huì)出現(xiàn)渾濁和更粘稠,。使用前,，請(qǐng)確保渦旋充分以獲得均勻的分散，或者更好的是,，聲音達(dá)到透明度,。混合物不*全再溶解會(huì)導(dǎo)致工作濃度降低,。

我可以在有血清的情況下使用 SAINT 嗎?

是的,！在血清存在的情況下，SAINT 轉(zhuǎn)染不會(huì)受到抑制,。然而,，由于 siRNA 極易被血清中存在的 RNA 酶降解，因此可以使用使用 SAINT-sRNA 的替代無(wú)血清 siRNA 轉(zhuǎn)染方案,。

抗生素會(huì)干擾我的轉(zhuǎn)染嗎?

不,！抗生素對(duì)轉(zhuǎn)染效率沒(méi)有影響,。

哪些參數(shù)會(huì)影響轉(zhuǎn)染結(jié)果?

通常，以下參數(shù)會(huì)影響轉(zhuǎn)染結(jié)果：

• DNA,、RNA,、寡核苷酸或蛋白質(zhì)的純度和濃度

• 載體序列（啟動(dòng)子、poly（A）-tail,、密碼子使用等）

• 添加的 SAINT/DNA 復(fù)合物量

• 靶細(xì)胞（細(xì)胞類(lèi)型,、細(xì)胞周期、傳代數(shù)等）

• 蛋白質(zhì)表達(dá)（時(shí)間依賴(lài)性表達(dá)水平,、表達(dá)蛋白質(zhì)的毒性等）

與大多數(shù)其他轉(zhuǎn)染試劑和遞送系統(tǒng)一樣,，使用高度純化的 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)/肽可獲得最佳結(jié)果,。

細(xì)胞的“轉(zhuǎn)染性"變化很大,。例如，非分裂和非貼壁細(xì)胞通常難以轉(zhuǎn)染,，而其他細(xì)胞類(lèi)型可能很容易轉(zhuǎn)染,，轉(zhuǎn)染效率在 80% 到 100% 之間。此外,，某些轉(zhuǎn)染試劑可能比其他試劑對(duì)某些細(xì)胞效果更好,，而某些試劑可能對(duì)特定細(xì)胞類(lèi)型有毒。因此,，我們建議花一些時(shí)間使用報(bào)告基因構(gòu)建體（如 GFP）優(yōu)化特定細(xì)胞類(lèi)型的轉(zhuǎn)染條件,。

為什么我使用雙倍量的 SAINT 時(shí)，我的轉(zhuǎn)染效率沒(méi)有翻倍?

SAINT-DNA/sRNA/mRNA 中的陽(yáng)離子組分與帶負(fù)電荷的 DNA/siRNA/mRNA 之間的電荷比對(duì)于高效轉(zhuǎn)染非常重要,。作為起點(diǎn),，我們建議使用 1：20 比例的 DNA/RNA：SAINT 試劑 （w：v）（例如，對(duì)于 12 孔規(guī)格,，0.5 ug DNA：10 ul SAINT-DNA）,。為了在您的實(shí)驗(yàn)中獲得最佳轉(zhuǎn)染結(jié)果，值得優(yōu)化 DNA/RNA 劑量（例如,，對(duì)于 12 孔規(guī)格,，0.25 ug – 1 ug DNA）和 DNA/RNA：SAINT 試劑比例（例如，對(duì)于 12 孔規(guī)格,，1：10 – 1：40）。

我應(yīng)該使用哪種 SAINT 試劑進(jìn)行 DNA,、RNA 和/或蛋白質(zhì)的共轉(zhuǎn)染?

我們的 SAINT 試劑針對(duì) DNA （SAINT-DNA）,、siRNA （SAINT-sRNA）、mRNA （SAINT-mRNA） 和蛋白質(zhì) （SAINT-protein） 的轉(zhuǎn)染進(jìn)行了優(yōu)化,，但它們都可以在一定程度上遞送其他分子,。根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)要求,，您可以將一種 SAINT 試劑用于兩個(gè)不同的分子，或者每個(gè)分子使用特定的 SAINT 試劑,。