希望改善組織切片中的細胞核染色？我們可以幫忙,！組織學(xué)標(biāo)本通常需要細胞核和組織的其他細胞成分之間的明顯區(qū)別,，以給病理學(xué)家提供最佳的診斷外觀。蘇木精一種堿性染料,，將細胞核染色，使其呈現(xiàn)藍色到紫色,。曙紅將粉紅色調(diào)添加到細胞質(zhì)中,，將紅色調(diào)添加到血細胞中，從而產(chǎn)生對比鮮明的藍紫色和粉紅色陰影,，這在標(biāo)本的細胞結(jié)構(gòu)中是截然不同的,。
對于使用組織學(xué)標(biāo)本的常規(guī)診斷,，使用蘇木精和伊紅(H&E)染色是目前觀察細胞結(jié)構(gòu)細節(jié)的方法,。因為這種染色顯示了如此廣泛的細胞質(zhì)、細胞核和細胞外基質(zhì)特征,，實驗室技術(shù)人員能夠控制嗜堿性染色的外觀和強度,，以滿足病理學(xué)家的期望。主要有兩種類型:Harris H&E,，一種回歸技術(shù),，和Gill的H&E，一種漸進技術(shù),。這篇文章討論了如何改善每種技術(shù)的嗜堿性核染色,。
Harris H&E染色:嗜堿性染色太弱
哈里斯蘇木精是一種回歸染色技術(shù),，因此組織切片首先用蘇木精過度染色以產(chǎn)生藍色細胞核，然后在分化步驟中在弱酸酒精中去除多余的染料,。
當(dāng)蘇木精的顏色太弱或標(biāo)本暴露在蘇木精中的時間不夠長時,，H&E染色中的弱嗜堿性核染色就會發(fā)生,。以下是我們推薦的解決方案:
蘇木精中的暴露時間太有限:
為了解決曝光時間，調(diào)整載玻片在蘇木精染色溶液中的時間長度,，直到您看到所需的染色強度,。蘇木精的pH值超出范圍:
為了解決蘇木精被稀釋超過pH值5-6的理想范圍的問題,，在染色過程中盡量減少水分帶入蘇木精溶液。水的pH值超出范圍:
染色前檢查水的pH值,，如果可能，用去離子水或蒸餾水代替自來水,。這可以解決水中含有太多氯的問題,，氯可以作為漂白劑；減弱蘇木精染色,。弱溶液滲透:
對于石蠟包埋標(biāo)本上的H&E染色,，如果嗜堿性染色太淺,，有可能石蠟沒有全從組織切片中溶解出來。如果組織切片中有蠟,，水基染色液不能適當(dāng)滲透標(biāo)本,，導(dǎo)致染色弱。將載玻片放回新鮮二甲苯中，去除切片中的石蠟,，然后繼續(xù)對組織標(biāo)本進行重新染色,。不良固定或組織處理:
弱嗜堿性染色的另一個原因是不良的固定或處理。這意味著染色劑不會與組織結(jié)合,；這是準(zhǔn)備紙巾的問題,。酸性酒精濃度過高:
如果酸性醇的濃度對于分化步驟來說太強,，或者如果樣本在酸性醇中花費了太多時間,，這種回歸染色技術(shù)可能導(dǎo)致太多的染料被去除。通過選擇較低濃度的酸性酒精溶液(即從1%變?yōu)?.5%溶液)或減少樣品在溶液中的時間來解決這一問題,。
Gill’s H&E染色:嗜堿性染色太弱
吉爾蘇木精是一種進行性染色。將染色劑施用于組織切片,，而不需要在區(qū)分劑(通常為酸性醇)中進行后續(xù)步驟,，以去除過量的嗜堿性染色劑。
- 蘇木精中的曝光時間太有限:要解決曝光時間,，調(diào)整載玻片在蘇木精染色中的時間長度,，直到您看到所需的染色強度。
- 蘇木精的pH值超出范圍:為了解決蘇木精被稀釋超過pH值5-6的理想范圍的問題,，在染色過程中,，盡量減少水分帶入蘇木精溶液。
- 水的pH值超出范圍:在染色前檢查水的pH值，如果可能,，用去離子水或蒸餾水代替自來水,。這可以解決水中含有太多氯的問題，氯可以作為漂白劑,，可以減弱蘇木精染色,。
- 弱溶液滲透:對于石蠟包埋標(biāo)本上的H&E染色,，如果嗜堿性染色太淺，有可能石蠟沒有全從組織切片中溶解出來,。如果組織切片中有蠟,，水基染色液不能適當(dāng)滲透標(biāo)本，導(dǎo)致染色弱,。將載玻片放回新鮮的二甲苯中,，去除切片中的石蠟，然后繼續(xù)對組織標(biāo)本進行重新染色,。
- 固定或處理不良:弱嗜堿性染色的另一個原因是固定或處理不良,。這意味著染色劑不會與組織結(jié)合；這是準(zhǔn)備紙巾的問題,。
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