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細菌中的蛋白質表達是迄今為止制備穩(wěn)定同位素富集蛋白質樣品的常用方法,。大腸桿菌是表達重組蛋白常用的生物體，是一種培養(yǎng)時間短的宿主,。大腸桿菌能夠使用簡單的分子技術進行直接的基因操作,，并且細胞對氘表現出良好的耐受性，從而可以使用13 C,、 15 N 和2 H

在厭氧條件下,，大腸桿菌可以使用葡萄糖、乙酸鹽和甘油作為其碳源以及銨鹽作為其氮源來合成所有 20 種必需氨基酸,。使用標記的基本介質試劑,，例如氧化氘、 15 N 銨鹽,、 13 C 6,、D 7或13 C 6 /D 7標記的葡萄糖,，可以直接生產均勻標記的蛋白質樣品。

使用相應的標記試劑獲得均勻的標記

I SOGRO 是一種源自藻類裂解物的復雜粉末狀豐富培養(yǎng)基,，旨在增強細菌中的蛋白質表達,。 ISOGRO 粉末具有13 C、 15 N 和2 H 標記的各種組合,，可用作獨立培養(yǎng)基或基本培養(yǎng)基的補充,，以提高蛋白質產量。

A,。 p38 生長的 SDS-PAGE,。數據由美國大學化學/生物化學系 Jeffrey W. Peng 博士提供美國印第安納州圣母院。 b. pLysS 中的心肌肌鈣蛋白 cTnC(1-89),。細胞在 37°C 搖瓶中生長,。紅色曲線是 ISOGRO 補充的最小介質，黑色曲線是單獨的最小介質,。

如果使用大腸桿菌無法成功進行蛋白質表達,，則可以考慮其他選擇，例如昆蟲細胞,、哺乳動物細胞或無細胞表達系統(tǒng),。