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genhunter:AP-TAG 試劑盒概述

閱讀:648      發(fā)布時間:2024-2-1
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AP-TAG 技術(shù)改變了細胞表面受體和配體的檢測和克隆方式。本發(fā)明的本質(zhì)是允許編碼受體的任何分泌性多肽配體或胞外結(jié)構(gòu)域的cDNA序列符合讀碼框地融合至pAPtag克隆載體中的人胎盤分泌性堿性磷酸酶(AP),。所得配體-AP 融合蛋白(稱為 AP-body)在 293T 或 CHO 細胞中表達時,,可以高水平分泌到培養(yǎng)基中,因此可以通過 AP 活性測定或使用抗 AP 抗體的蛋白質(zhì)印跡分析輕松檢測到,。因此,,配體-AP或可溶性受體-AP融合蛋白可以像抗體一樣充當親和劑,從而可以方便,、安全和靈敏地檢測和克隆其相應的細胞表面受體或配體,。與傳統(tǒng)的放射性125I標記方法不同,AP-TAG是安全的,,不需要配體/可溶性受體純化,。

自發(fā)明以來,AP-TAG技術(shù)已克隆了許多重要的細胞表面受體和配體,,包括Leptin,、Semaphorin III、Nogo-66,、IL-24,、Jelly Belly的受體以及Kit,、Mek4和Sek受體酪氨酸激酶的配體。

如果您正在使用通過 DD 或其他方法克隆的分泌蛋白或細胞表面分子,,AP-TAG 技術(shù)可以讓您進一步對這些基因進行功能表征,。

AP-TAG Kit B

用于受體/配體相互作用的非放射性檢測。

 

這種單向量系統(tǒng)是第三代AP-TAG技術(shù),。分泌型配體或可溶性受體可以與分泌型堿性磷酸酶(AP)在其N端或C端融合以產(chǎn)生“AP體",。所得的 AP 融合蛋白可以作為分泌蛋白表達,并直接用作高度敏感的親和劑,,就像抗體一樣,。表位標簽(6xHis 和 myc)可以輕松純化、檢測和相互作用測定 (IP) AP 融合蛋白,。下面列出了其他改進的功能,。

AP-TAG Kit A

用于受體/配體相互作用的非放射性檢測。

 

這是使用 pAPtag-2 和 pAPtag-4 載體的第二代 AP-TAG 技術(shù),。分泌型配體或可溶性受體可以與分泌型堿性磷酸酶(AP)在其N端或C端融合以產(chǎn)生“AP體",。所得的 AP 融合蛋白可以作為分泌蛋白表達,并直接用作高度敏感的親和劑,,就像抗體一樣,。


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