儲存
凍干肽應(yīng)儲存在陰涼,、避光,、干燥的地方。為了獲得最佳保存效果,,請將肽儲存在 -20°C 或更低的溫度下,,并遠(yuǎn)離強(qiáng)光。大多數(shù)在此溫度下儲存的肽將保持穩(wěn)定數(shù)年,。
吸收水分會大大降低肽的穩(wěn)定性,,并可能降低總肽含量。含有肽的小瓶在打開之前應(yīng)先升溫至室溫,。這將減少固體肽的冷表面或容器內(nèi)部從空氣中吸收水分,。取出所需數(shù)量后,應(yīng)盡快重新密封小瓶,,最好在干燥氮?dú)鈿夥障?,然后將其放回冷藏室?/span>
溶液中含有 Met、Cys 或 Trp 殘基的肽的保質(zhì)期因氧化而受到限制,。為了避免重復(fù)凍融循環(huán),,建議將儲備溶液分成等份。如果絕對無法避免在溶液中儲存肽,,請使用 pH 5-6 的無菌緩沖液,,并在 -20°C 下儲存等分試樣,以延長溶液中肽的儲存期限,。溶解度肽的溶解度取決于序列,。溶解肽可能很困難,,特別是當(dāng)肽非常疏水時。一般來說,,嘗試將肽溶解在無菌蒸餾水中,。如果肽仍然不溶,請嘗試以下步驟:
超聲處理可能會有所幫助,,因?yàn)樗梢蕴岣呷芙馑俣取?/span>
堿性肽添加10%乙酸或0.1% TFA,;對于酸性肽,使用 1% 氫氧化銨或 10% 碳酸氫銨進(jìn)一步超聲處理可提高溶解度,。
對于仍然不溶的肽,,添加有機(jī)溶劑,例如乙腈,、DMSO 或 DMF,,濃度高達(dá) 20% (v/v)。請注意,,這些溶劑可能會干擾某些生物測定,。對于具有二級結(jié)構(gòu)的肽,可能需要添加離液劑,,例如尿素或鹽酸胍,。
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