生物綴合物是指一個(gè)分子通常通過(guò)共價(jià)鍵連接到另一個(gè)分子上,以形成由兩個(gè)連接在一起的分子組成的復(fù)合物,。生物共軛技術(shù)在開(kāi)發(fā)針對(duì)特定目標(biāo)的衍生蛋白質(zhì),、DNA、RNA和碳水化合物的新型研究方面具有廣泛的應(yīng)用,,例如配體發(fā)現(xiàn),、疾病診斷和高效篩選。這是一個(gè)具有廣闊前景的研究領(lǐng)域,。
生物共軛是兩個(gè)生物分子共價(jià)鍵合的過(guò)程,。常見(jiàn)的生化偶聯(lián)包括賴氨酸氨基酸殘基的胺偶聯(lián)、半胱氨酸殘基的硫氫基偶聯(lián),,以及常常由光化學(xué)引發(fā)的自由基反應(yīng),。生物共軛的產(chǎn)物是生物共軛物。
最常見(jiàn)的生物偶聯(lián)是小分子的偶聯(lián),,例如生物素與蛋白質(zhì)的偶聯(lián),;以及蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的偶聯(lián),例如抗體與酶的偶聯(lián),。其他不常見(jiàn)的偶聯(lián)分子,,如寡糖、核酸,、合成聚合物:聚乙二醇,、碳納米管。生物綴合物包括抗體-藥物復(fù)合物 (ADC),、聚乙二醇化蛋白,、siRNA 復(fù)合物和疫苗復(fù)合物。
小分子屬于半抗原,,僅具有反應(yīng)性但不具有免疫原性。它們只有與載體(通常是蛋白質(zhì),,也有多肽)偶聯(lián)形成完整抗原后才具有免疫原性,,進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后才會(huì)產(chǎn)生抗體,。 。載體蛋白是能夠自行引發(fā)免疫反應(yīng)的大分子,。許多不同類型的載體蛋白可以與小分子綴合以制備完整抗原,。常用的載體包括牛血清白蛋白、匙孔血藍(lán)蛋白,、卵清蛋白,、牛甲狀腺球蛋白等。載體蛋白的選擇主要涉及其溶解度,、大小,、偶聯(lián)基團(tuán)、免疫原性,、成本等因素,。目前市場(chǎng)上應(yīng)用廣泛的牛血清白蛋白BSA主要是由于BSA化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,不易變性,,分子中含有多種氨基,,且賴氨酸含量高,廉價(jià)易得,。但 BSA 限制了其在一些免疫測(cè)定實(shí)驗(yàn)中作為封閉劑的用途,。第二個(gè)選擇是匙孔血藍(lán)蛋白KLH和卵清蛋白OVA。
1,、對(duì)于帶有羧基或氨基的化合物,,采用碳二亞胺法和混合酸酐法;
2,、含有巰基的化合物,,采用馬來(lái)酰亞胺法;
3,、對(duì)于分子結(jié)構(gòu)中帶有氨基的化合物,,戊二醛法是常用的方法。
1.生化評(píng)估:
綴合小分子可用作嚴(yán)格生化分析的探針,,生物素等非熒光小分子也可用作機(jī)械探針,。
2.診斷應(yīng)用:
臨床樣本的定性和定量分析對(duì)于早期疾病診斷至關(guān)重要,抗體-抗原相互作用的高特異性避免了樣本純化,,可廣泛應(yīng)用,。
3、工業(yè)應(yīng)用:
生物共軛可用于很多行業(yè),,可以用于食品行業(yè),,如異構(gòu)化富馬酸和蘋果酸,用于食品殘留檢測(cè);醫(yī)藥工業(yè)利用固定化酶進(jìn)行藥物合成,,也可用于藥物檢測(cè),。代理檢測(cè)等
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