OptiVitro® T細胞無血清培養(yǎng)基

? 無血清,，無異種成分，無外源生長因子
? 支持T細胞的快速增殖和高密度培養(yǎng),，可用于大規(guī)模工藝流程
? 提供瓶裝&袋裝兩種形式,，便于生產(chǎn)規(guī)模擴大和商業(yè)化開發(fā)
? 適合于多種激活方法，可支持較長周期的穩(wěn)定培養(yǎng)（＞14天）
? 自主研發(fā),，供貨穩(wěn)定,，可提供定制化服務（配方優(yōu)化等）
? 按照GMP標準生產(chǎn)和管理， 完成FDA DMF備案

應用：適合用于擴增人外周血單個核細胞（PBMC）中的 T 細胞,，也適合于 T 細胞的重激活擴增培養(yǎng),。應用于T細胞療法開發(fā)，如CAR-T,、TCR-T,、TIL等。

• 常見問題

  1. 組分：
  本產(chǎn)品每1L基礎(chǔ)培養(yǎng)基配發(fā)8mL添加組分,，添加組分不是ICSR或者血替,，化學成分明確，可放心使用,，必須配成全培養(yǎng)基后再使用,；——可以提供成分說明及TSE/BSE的申明。
  2. T細胞激活方式：
  使用本產(chǎn)品,，可根據(jù)說明書用抗體包板方式進行激活,，也可購買商業(yè)抗體偶聯(lián)磁珠進行激活，本產(chǎn)品同樣支持磁珠激活,。
  3. 活率：
  直接培養(yǎng)PBMC,，D5后活率可達90%以上，從PBMC中分選出T細胞,，則D3開始活率可達到90%以上,，D7后活率均可達到95%以上；如果轉(zhuǎn)導CAR,，轉(zhuǎn)導當天活率顯著下降,，為正常現(xiàn)象,，繼續(xù)培養(yǎng)活率會持續(xù)上升,。
  4. 培養(yǎng)方式：
  使用本產(chǎn)品，比較推薦的培養(yǎng)方式是D0天激活,，D3,、D5、D7補充培養(yǎng)液將細胞密度調(diào)整到0.5-1x10^6cells/ml,D7后可選擇2天或3天補一次液,。
  5. T細胞擴增速度：
  T細胞的擴增在D3-D9速度較快,，基本平穩(wěn),，D9細胞擴增倍數(shù)一般可以達到200倍以上。D9后細胞擴增速度逐漸減緩,，激活PBMC中的T細胞,，最多可培養(yǎng)20天。
  6. 高密度培養(yǎng)：
  靜置培養(yǎng),，密度可達5-6x10^6 cells/ml,，搖瓶培養(yǎng)或其他震蕩培養(yǎng)方式，密度可達10x10^6 cells/ml以上,。
  7. CD4/CD8比例調(diào)節(jié)：
  使用本產(chǎn)品并且用磁珠激活,，CD4比例較高，用抗體包板激活則CD8比例較高,，可以通過改變激活方式,、改變抗體包板濃度，調(diào)節(jié)CD4/CD8比例,。
  8. T細胞亞型分群：
  Tn為初始T細胞，Tcm為中央記憶型T細胞,，Tem為激活的Tcm,，Tef為效應T細胞，分群比例隨著細胞培養(yǎng)的時間而變化,。不同客戶對分群的要求可能不同,，且不同激活方式、細胞因子的選擇以及濃度,，對分群影響很大,，建議客戶自行測試。
  9. T細胞轉(zhuǎn)導：
  根據(jù)客戶反饋測試數(shù)據(jù),，本產(chǎn)品陽性率可達到50%左右,，但是不同客戶使用的工藝不同，可能導致陽性率有變化,。CAR慢病毒轉(zhuǎn)導,，可使用polybrene輔助轉(zhuǎn)導，逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)導可使用retronectin輔助轉(zhuǎn)導,，也有許多新型輔助因子可提高轉(zhuǎn)導效率,；采用離心轉(zhuǎn)導的方式可提高轉(zhuǎn)導效率。
  10. T細胞生物反應器培養(yǎng)：
  靜置培養(yǎng)后D5-D7開始在反應器中培養(yǎng),，在達到目標體積之前,，可以2-3天補液細胞密度調(diào)整到0.5-1x10^6 cells/ml，到達目標體積后可以采取部分灌流策略,。