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傳代方法

復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋,，搖晃凍存管加速溶解,，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),，1000-1200rpm離心5min,，棄去上清液，用1-2mL全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL全培養(yǎng)基的T25瓶中,，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除,，PBS清洗兩遍后,，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況,，在細(xì)胞邊緣縮小,，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，肉眼可見細(xì)胞層脫落,，即消化完成,，否則繼續(xù)消化）,，直接吸掉胰酶，加入5-6mL全培養(yǎng)基,，輕輕吹打細(xì)胞層,，把細(xì)胞層吹落，吹散,。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,，添加適當(dāng)?shù)娜囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻,，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,，定期換液（每周2-3次）,，待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時，重復(fù)傳代操作或者凍存,。

生長條件

培養(yǎng)溫度37℃,；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣；

生長特性

貼壁生長

存儲條件

液氮

安全等級

0

形態(tài)

上皮細(xì)胞樣,，多角形,，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長