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上海牧榮生物科技有限公司

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EvaGreen® 基于染料的 qPCR 預混液 介紹

閱讀:901      發(fā)布時間:2023-8-24
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特征:


  • EvaGreen® Dye – 信號比 SYBR® Green 更好,,更安全,、更環(huán)保

  • Cheetah™ Hotstart Taq – 在 95°C 下兩分鐘后全激活,以實現(xiàn)快速循環(huán)方案

  • 配備 2 色跟蹤系統(tǒng),,有助于發(fā)現(xiàn)移液錯誤,,節(jié)省時間、試劑,、DNA 樣本和 $$$

  • 可以不使用 ROX 被動染料,,使用單獨的 ROX 管,或與 ROX 預混合(高濃度或低濃度)

我們的Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 主混合物是熱啟動 EvaGreen® 基于染料的主混合物,,用于實時 PCR 應用和 DNA 熔解曲線分析,。這些預混液可代替任何 SYBR® Green 染料基預混液。 Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 主混合物含有低濃度的惰性藍色染料,,使您可以輕松看到含有主混合物的孔,。

主混合物可不含 ROX 被動染料,帶有單獨的 ROX 管,或與 ROX 預混合(高濃度或低濃度),。試劑盒配有 2 色跟蹤系統(tǒng),,其中包括 DNA 模板緩沖液(一種深藍色染料),當與模板混合時,,添加模板后會將反應從淺藍色變?yōu)樯钏{色(圖 1,,左)。 2 色跟蹤系統(tǒng)可以防止移液錯誤,,避免浪費時間,、試劑和珍貴的 DNA 樣本。

圖 1. 含有淺藍色染料的 Forget-Me-Not™ EvaGreen® Master Mix(2 色追蹤)在添加含有深藍色模板緩沖液的模板之前(左)和之后(右),。

圖 2. Forget-Me-Not  EvaGreen® qPCR 主混合物的性能與其他基于染料的 PCR 主混合物一樣好或更好,,具有出色的亮度和靈敏度。

EvaGreen® 染料
一種 DNA 結合染料,,具有非常適合 qPCR 和高分辨率 Melting® (HRM) 分析*的功能。 EvaGreen® 染料通過新穎的“按需釋放"機制與 dsDNA 結合,,允許在 qPCR 中使用相對較高的染料濃度,,而不會產(chǎn)生 PCR 抑制(Mao, et al. 2007. BMC Biotech. 7, 76-91) 。

EvaGreen® 染料的其安全性非常好,。 DNA 結合染料本質(zhì)上是危險的,,因為它們有可能引起突變??紤]到這一點,,Biotium 的科學家設計了 EvaGreen® 染料,使其無法穿過細胞膜,,從而防止染料與活細胞中的基因組 DNA 接觸,。所有其他商業(yè) PCR 染料只需幾分鐘即可進入細胞。例如,,SYBR® Green I 已被證明比溴化乙錠(一種的誘變劑)具有更大的環(huán)境毒性(Ohta, et al. 2001. Mut. Res. 492, 91-97),。獨立實驗室已證實 EvaGreen 染料不會導致突變、無細胞毒性,,并且對水生生物來說是安全的,,可以直接丟棄在排水溝中。

基于 EvaGreen® 的預混液的另一個好處是,,您可以通過凝膠電泳分析 PCR 產(chǎn)物,,而無需在上樣緩沖液或凝膠中添加另一種 DNA 結合染料。主混合物中的 EvaGreen® 染料可充當 DNA 預染色劑,,允許在電泳后直接觀察 DNA 帶,。

Cheetah™ HotStart Taq
Cheetah™ HotStart Taq DNA 聚合酶是 Biotium 專有的化學修飾熱啟動 DNA 聚合酶。 Cheetah™ Taq 在室溫下全失活,在 95°C 2 分鐘后全激活,,使其特別適合快速循環(huán) PCR 方案,。

qPCR 預混液


Forget-Me-Not™ 通用探針 qPCR Master Mix 是一款高性能產(chǎn)品,適用于基于熒光探針的 PCR 應用,,包括定量和 SNP 基因分型,。該試劑盒適用于所有基于熒光探針的技術,包括水解探針(例如 TaqMan® 和雙標記 BHQ® 探針)和位移探針(例如分子信標),。 Forget-Me-Not™ 通用探針 qPCR Master Mix 在單重和多重反應中顯示出出色的結果一致性,,具有廣泛的儀器兼容性,并且可用于標準和快速方案,。如果您的儀器需要 ROX 參考染料,,ROX 還提供單獨的套件。

該套件包括 40X Forget-Me-Not™ 跟蹤緩沖液,,其中含有惰性藍色染料,。您可以選擇將跟蹤緩沖液添加到預混液、DNA 模板中,,或者在反應中不使用跟蹤緩沖液,。在主混合物中添加跟蹤緩沖液可以讓您輕松區(qū)分含有反應混合物的孔和空孔。另一方面,,將跟蹤緩沖液添加到 DNA 模板樣品中可讓您在設置 PCR 反應時跟蹤已添加模板的反應,。

圖 3.勿忘我通用探針預混液對于多重探針 PCR 反應效果非常好。


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