血管細胞基礎培養(yǎng)基是一種無菌、不含酚紅的液體組織培養(yǎng)基，旨在用作完整 ATCC 原代細胞解決方案系統(tǒng)中的一個組件,。血管細胞基礎培養(yǎng)基旨在支持源自正常人大血管的細胞,，例如人臍靜脈內(nèi)皮細胞,、主動脈內(nèi)皮細胞或主動脈平滑肌細胞,，以及微血管內(nèi)皮細胞,。此外,，為了支持血管系統(tǒng)細胞的增殖和鋪板效率，血管細胞基礎培養(yǎng)基必須補充適當?shù)募毎禺愋陨L試劑盒,。
具體應用
血管細胞基礎培養(yǎng)基是一種無菌、不含酚紅的液體組織培養(yǎng)基,，旨在用作完整 ATCC® Primary Cell Solutions™ 系統(tǒng)的一個組件。
該系統(tǒng)旨在支持源自正常人類大血管的細胞,，例如人臍靜脈內(nèi)皮細胞,、主動脈內(nèi)皮細胞或主動脈平滑肌細胞,，以及微血管內(nèi)皮細胞。血管細胞基礎培養(yǎng)基含有必需和非必需氨基酸,、維生素,、其他有機化合物、微量礦物質(zhì)和無機鹽,。為了支持血管系統(tǒng)細胞的增殖和鋪板效率,，血管細胞基礎培養(yǎng)基必須補充適當?shù)募毎禺愋陨L試劑盒。
該系統(tǒng)旨在支持源自人類心血管系統(tǒng)的細胞,，包括以下細胞類型：
源自大血管的內(nèi)皮細胞
微血管內(nèi)皮細胞
源自大血管的平滑肌細胞
源自心臟的肌肉細胞
該系統(tǒng)旨在支持源自正常人類大血管的細胞,，例如人臍靜脈內(nèi)皮細胞、主動脈內(nèi)皮細胞或主動脈平滑肌細胞,，以及微血管內(nèi)皮細胞,。血管細胞基礎培養(yǎng)基含有必需和非必需氨基酸、維生素,、其他有機化合物,、微量礦物質(zhì)和無機鹽。為了支持血管系統(tǒng)細胞的增殖和鋪板效率,，血管細胞基礎培養(yǎng)基必須補充適當?shù)募毎禺愋陨L試劑盒,。
原代心肌細胞；正常,，人類,，ATCC PCS-120-010
原代主動脈平滑肌細胞；正常,，人類,，ATCC PCS-100-012
原發(fā)性冠狀動脈平滑肌細胞；正常,，人類,，ATCC PCS-100-021
原發(fā)性肺動脈平滑肌細胞；正常,，人類,，ATCC PCS-100-023
原代真皮微血管內(nèi)皮細胞；正常,、人類,、新生兒、ATCC PCS-110-010
原代臍靜脈內(nèi)皮細胞,；正常,，人類，ATCC PCS-100-010
原代臍靜脈內(nèi)皮細胞；正常,，人類,，混合，ATCC PCS-100-013
原代主動脈內(nèi)皮細胞,；正常,，人類，ATCC PCS-100-011
原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞,；正常,，人類，ATCC PCS-100-020
原代肺動脈內(nèi)皮細胞,；正常,，人類，ATCC PCS-100-022
慶大霉素-兩性霉素 B 溶液 (ATCC PCS-999-025)
青霉素-鏈霉素-兩性霉素 B 溶液 ( ATCC PCS-999-002 )
酚紅 ( ATCC PCS-999-001 )
微血管內(nèi)皮細胞生長試劑盒-BBE ( ATCC PCS-110-040 )
微血管內(nèi)皮細胞生長試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-110-041 )
內(nèi)皮細胞生長試劑盒-BBE ( ATCC PCS-100-040 )
內(nèi)皮細胞生長試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-100-041 )
對于源自大血管的內(nèi)皮細胞（例如,，正常原代人臍靜脈內(nèi)皮細胞 (HUVEC),、ATCC PCS-100-010、原代臍靜脈內(nèi)皮細胞,；正常、人,、混合,、ATCC PCS-100-013、原代主動脈內(nèi)皮細胞Cells,，ATCC PCS-100-011）,，用以下試劑盒之一補充血管細胞基礎培養(yǎng)基：
對于源自正常人體組織的微血管內(nèi)皮細胞（例如，原代真皮微血管內(nèi)皮細胞,；正常,、人類、新生兒,、ATCC PCS-110-010）,，用以下試劑盒之一補充血管細胞基礎培養(yǎng)基：
對于源自大血管的平滑肌細胞（例如，原代主動脈平滑肌細胞,，ATCC PCS-100-012）,，用血管平滑肌細胞生長試劑盒（ATCC PCS-100-042）補充血管細胞基礎培養(yǎng)基。
可選媒體補充：
處理程序
完整生長培養(yǎng)基的制備
表 1.如果使用內(nèi)皮細胞生長試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-100-040),，請?zhí)砑用糠N成分的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
牛腦提取物 (BBE) | 1.0毫升 | 0.2% |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de松半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 10.0毫升 | 2% |
| 抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 2 . 如果使用內(nèi)皮細胞生長試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-100-041)，請?zhí)砑用總€成分的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
重組人VEGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
rh FGF 堿性 | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人IGF-1 | 0.5毫升 | 15納克/毫升 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de松半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 10.0毫升 | 2% |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 3 . 如果使用血管平滑肌生長試劑盒 (ATCC ® PCS-100-042)，請?zhí)砑用總€組件的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
rh FGF-堿性 | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人胰島素 | 0.5毫升 | 5微克/毫升 |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
表 4.如果使用微血管內(nèi)皮細胞生長試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-110-040),，請?zhí)砑用糠N成分的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
牛腦提取物 (BBE) | 1.0毫升 | 0.2% |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de松半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 5 . 如果使用微血管內(nèi)皮細胞生長試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-110-041),，請?zhí)砑用糠N成分的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
重組人VEGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
rh FGF 堿性 | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人IGF-1 | 0.5毫升 | 15納克/毫升 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de松半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 6.如果使用心肌細胞生長試劑盒 (ATCC ® PCS-120-040)，請?zhí)砑用糠N成分的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
胎球蛋白 | 5.0毫升 | 25毫克/毫升 |
重組人FGF-b | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人胰島素 | 0.5毫升 | 5毫克/毫升 |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
重組人EGF/TGF-b1 | 0.5毫升 | 5 納克/毫升,，30 皮克/毫升 |
增殖不需要抗菌劑和酚紅,，但如果需要可以添加,。表 7 總結(jié)了添加到完整生長培養(yǎng)基中的每種可選組分的建議體積。
從冰箱中取出一套生長套件,；確保所有組件的蓋子均已擰緊,。
在將生長套件的組件添加到基礎培養(yǎng)基中之前將其解凍。在添加到基礎培養(yǎng)基之前,，需要在 37°C 水浴中加熱 L-谷氨酰胺組分并搖動以溶解任何沉淀物,。
從冷藏處獲取一瓶血管細胞基礎培養(yǎng)基 (475 mL)。
用 70% 乙醇噴灑所有生長套件組件小瓶和基礎培養(yǎng)基瓶的外表面,，以凈化它們,。
使用無菌技術并在層流罩或生物安全柜中工作，使用單獨的無菌移液器將表 1,、2,、3、4 或 5 中所示的每個生長套件組件的體積轉(zhuǎn)移到基礎培養(yǎng)基瓶中轉(zhuǎn)移,。
表 7.添加抗菌劑/抗真菌劑和酚紅（可選）
成分 | 體積 | 最終濃度 |
慶大霉素-兩性霉素B溶液 | 0.5毫升 | 慶大霉素：10 µg/mL 兩性霉素 B：0.25 µg/mL |
青霉素-鏈霉素-兩性霉素B溶液 | 0.5毫升 | 青霉素：10 單位/mL 鏈霉素：10 µg/mL 兩性霉素 B：25 ng/mL |
酚紅 | 0.5毫升 | 33微米 |
蓋緊生長培養(yǎng)基的瓶子并輕輕旋轉(zhuǎn)內(nèi)容物以確保溶液均勻,。請勿用力搖晃，以免產(chǎn)生泡沫,。給瓶子貼上標簽并注明日期,。
完整的生長培養(yǎng)基應在 2°C 至 8°C 的黑暗條件下保存（不要冷凍）。在這些條件下儲存時,，完整培養(yǎng)基可穩(wěn)定保存 30 天,。
冷凍保存
1. 檢查所有容器是否有泄漏或破損。
2. 將基礎培養(yǎng)基保存在 2°C 至 8°C 下,。不要凍結(jié),。避光。使用前加熱介質(zhì)時,，溫度不要超過 37°C,。當在 2°C 至 8°C 的黑暗中儲存時，產(chǎn)品在標簽上的有效期內(nèi)保持穩(wěn)定,。
細菌和真菌測試:沒有檢測到
支原體污染:沒有檢測到
內(nèi)毒素:< 0.5 EU/毫升
滲透壓:270±10毫滲透壓/千克
酸堿度:7.8±0.3
功能測試:增殖率和形態(tài)
本產(chǎn)品僅供實驗室研究使用,。它不適用于任何動物或人類治療用途、任何人類或動物消費或任何診斷用途,。
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