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在五十年的研究歷程中，從開(kāi)始研究cAMP,，cGMP在各種生理過(guò)程中的調(diào)節(jié)作用,，到近幾年與之相關(guān)的藥物研發(fā)，藥物篩選領(lǐng)域,，人們一直在努力尋找一種快速,、靈敏、特異性和可重復(fù)地定量檢測(cè)cAMP和cGMP含量的方法,。

檢測(cè)方法演變

cAMP,，cGMP分子量分別只有329.21和345.21,，在機(jī)體內(nèi)的含量極低，為p mol/L級(jí)別,，用一般的分析方法無(wú)法測(cè)定,。70年代一系列測(cè)定cAMP和cGMP的方法被發(fā)明出來(lái)，最基本的原理有三種：分別是競(jìng)爭(zhēng)性蛋白質(zhì)結(jié)合分析法[3],、放射性免疫分析法[4]和薄層色譜法[5],。在80年代，放射性免疫分析法得到了廣泛的應(yīng)用和改進(jìn),，由于這種方法采用放射性核素標(biāo)記,，應(yīng)用范圍受到一定限制，為了進(jìn)一步提高檢測(cè)的靈敏度和操作的安全性,，進(jìn)入90年代又陸續(xù)發(fā)明了各種酶標(biāo)記法和化學(xué)發(fā)光法的競(jìng)爭(zhēng)性ELISA檢測(cè)試劑盒,，這一類(lèi)檢測(cè)方法的根本原理都是基于抗體抗原的免疫反應(yīng)，所有這些試劑盒中采用的抗體全部是兔抗血清或者是經(jīng)過(guò)特異親和提純之后的抗cAMP或cGMP的兔多抗,，毫無(wú)疑問(wèn),，兔多抗在約四十年的cAMP，cGMP定量檢測(cè)中做出了巨大貢獻(xiàn),，但同時(shí)它也有著明顯的缺陷：

1,，兔多抗對(duì)cAMP，cGMP的特異性不高,，會(huì)與其他核苷類(lèi)似分子發(fā)生交叉反應(yīng),，盡管可以通過(guò)特異親和提純降低交叉，但仍然無(wú)法消除交叉,；

2,，兔多抗對(duì)cAMP和cGMP的親和力受高濃度的二價(jià)陽(yáng)離子（比如Mg²⁺和Ca²⁺）的影響；

3,，兔多抗在制備的過(guò)程中存在個(gè)體差異和批間差異,，難以保證檢測(cè)數(shù)據(jù)的重復(fù)性；

4,，兔多抗試劑盒在cAMP，cGMP樣品的處理上也需要進(jìn)行乙?；幚?，這與兔多克隆抗體制備方法有必然關(guān)系，如果不乙?；瘜o(wú)法達(dá)到檢測(cè)所需的靈敏度,。

所以無(wú)論標(biāo)記方法如何革新，不改進(jìn)抗體,，仍然不能從根本上迎來(lái)cAMP,，cGMP定量檢測(cè)的變革,。

cAMP和cGMP單克隆抗體成功開(kāi)發(fā)

NewEast Biosciences（紐斯特）公司的科學(xué)家經(jīng)過(guò)兩年的研發(fā)，篩選了4萬(wàn)多個(gè)克隆,，終于從中發(fā)現(xiàn)了高特異性,，高親和力的cAMP和cGMP單克隆抗體。并成功構(gòu)建了基于單抗的cAMP和cGMP ELISA檢測(cè)試劑盒,。這個(gè)cAMP（cGMP）單抗對(duì)非乙?；腸AMP（cGMP）的特異性識(shí)別能力是其對(duì)cGMP（cAMP）、ATP（GTP）以及其他核苷類(lèi)似物識(shí)別能力的10⁸倍以上,，這相比于以往的多抗試劑盒大大提高了cAMP (cGMP) 檢測(cè)的靈敏性和特異性,，并且極大的降低了試劑盒的批間差異，提供了長(zhǎng)久有效地可重復(fù)性檢測(cè),，也擺脫了繁瑣的乙?；^(guò)程和對(duì)科研人員健康不利的乙酰化揮發(fā)試劑,。