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　　常用的計(jì)數(shù)方法主要有手工計(jì)數(shù)(如利用改良牛鮑計(jì)數(shù)板)和細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)(經(jīng)費(fèi)充裕組常備),。從原理來說,，這兩種方法基本類似，大致是通過臺(tái)盼蘭或者熒光染料染色后,，用肉眼或者用攝像機(jī)拍照后進(jìn)行計(jì)數(shù),，差別就是前者人累，且精準(zhǔn)度和穩(wěn)定性較差,；后者不累人,，且精準(zhǔn)度和穩(wěn)定性較好。

　　單細(xì)胞測(cè)序?qū)嶒?yàn)的第一步是單細(xì)胞懸液的制備,，而懸液制備中細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性直接影響單細(xì)胞測(cè)序的數(shù)據(jù)質(zhì)量,。

　　1.  計(jì)數(shù)板

　　用96%酒精沖洗計(jì)數(shù)板后，用干凈鹿皮擦凈,，另擦凈蓋片一張,；把蓋片覆在計(jì)數(shù)板上面，使之微微移向一側(cè),，露出計(jì)數(shù)板臺(tái)面少許,，以便滴加細(xì)胞懸液,；

　　2.  染色

　　取吸管1 支，伸入培養(yǎng)瓶中,，輕輕反復(fù)吹打細(xì)胞懸液使細(xì)胞重懸均勻后,，立即吸細(xì)胞懸液少許，向另一離心管中滴入細(xì)胞懸液9 滴,，再滴入臺(tái)盼藍(lán)染液1 滴，混勻,，置2~3 分種,；

　　3.  加懸液

　　把計(jì)數(shù)板平放在顯微鏡臺(tái)上，立即從計(jì)數(shù)板邊緣輕輕滴1~2 滴已染色的細(xì)胞懸液,，使之充滿計(jì)數(shù)板和蓋片間空隙中,；

　　4.  鏡檢

　　鏡下觀察可見細(xì)胞分散各處，健康細(xì)胞胞體完整,，透明不著色,，凡著色細(xì)胞均為不健康者。計(jì)算四角大方格內(nèi)的細(xì)胞數(shù),；壓中線者只計(jì)算左線和上線者,，右線和下線不計(jì)算在內(nèi)(即僅計(jì)算壓兩個(gè)邊的細(xì)胞)。

　　5.  接種培養(yǎng)

　　通過計(jì)數(shù)測(cè)知懸液中細(xì)胞數(shù)后,，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需細(xì)胞數(shù)量向培養(yǎng)容器中接種,。細(xì)胞接種數(shù)量隨實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒀搴亢图?xì)胞生物性狀而定,；一般接種量在1~10x105細(xì)胞/毫升范圍,，實(shí)驗(yàn)周期短，希望細(xì)胞增殖較快時(shí),，接種量可大些,。用含血清量大的培養(yǎng)液培養(yǎng)胚胎來源細(xì)胞、無限細(xì)胞系和惡性細(xì)胞系時(shí),，細(xì)胞接種數(shù)量不宜太大,。