生化試劑是指有關生命科學研究的生物材料或有機化合物,,以及臨床診斷,、醫(yī)學研究用的試劑。
試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標之一,,但不能反映試劑質(zhì)量的全部,。試劑成份、純度,、用量及穩(wěn)定性,,才是保證試劑質(zhì)量的關鍵所在。
1 ,,試劑空白
試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標之一,。每種試劑都有一定的空白吸光度范圍,試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì),;如利用Trinder反應為原理的檢測試劑會因含酚類物質(zhì)被氧化為醌而變?yōu)榧t色,。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶,、淀粉酶等檢測試劑會因基質(zhì)分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃,。有些試劑久置后變渾濁。這些情況均可使空白吸光度升高,。原則上,,吸光度上升的反應,其試劑空白吸光度越低越好,,不能超過一個高限,;相反,吸光度下降的反應,,其試劑空白吸光度不能低于一個低限,。
2, 樣品信息
樣品的溶血,、脂血,、黃疸等會對測定結果產(chǎn)生非化學反應的干擾。因此,,應根據(jù)溶血,、脂濁、黃疸的光譜吸收特性,,采用雙波長或多波長的檢測模式,,并在結果計算中扣除因溶血、脂血,、黃疸引起的影響,,減少干擾程度。
3 ,測定范圍
每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍,,樣品結果若超過此范圍,,分析儀將顯示結果超過范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì),,應更換合格試劑,。
4 ,底物耗盡
使用連續(xù)監(jiān)測法,、兩點法測定酶活性時,,若酶活性非常高,底物接近被耗盡,,吸光度上升或下降會超過某一吸光度變化范圍,,監(jiān)測期的吸光度將偏離線性,使測定結果不可靠,。
5,, 酶的預活化
測定血清中的某些酶,如CK,,離體(采血)后很容易失活,。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基(一SH)被氧化造成的。只有通過適當?shù)倪€原作用才能重新激活,。如CK—NAC試劑盒即含有CK活化劑,,名為N一乙酰半胱氨酸。實驗研究證明,,NAC對血清中已失活的CK活化過程約需180 S,。這就是CK測定為什么要延遲時間較長的理論依據(jù)。在AST,,ALT采用IFCC推薦方法測定時需要磷酸吡哆醛預活化,。需要強調(diào):含有活化劑的生化試劑,其測定酶活性的結果要高些,。
6,、 校準與結果溯源性
酶的校正:要滿足在同一方法學、同一測定條件,、與理論計算的FACTOR值差異不大,,沒有發(fā)現(xiàn)有明顯影響因素,方可進行校正,。
7,, 試劑抗干擾作用的合理性
有些液體雙試劑,其實質(zhì)并不真正具備抗干擾的能力而只是解決了試劑的液體化和穩(wěn)定性問題,。
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