該試劑可將大多數(shù)細(xì)胞中慢病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)率提高10倍。它是針對慢病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒感染大多數(shù)細(xì)胞而優(yōu)化的聚合物混合物,。以 500x 溶液形式提供,,足以在 24 孔板中進(jìn)行 100 次轉(zhuǎn)導(dǎo)。它用于逆轉(zhuǎn)錄病毒或慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)
規(guī)格:100 µl (PV100) 或 500 µl (PV500)
運(yùn)輸:環(huán)境溫度
儲存:本產(chǎn)品在 4 °C 下可穩(wěn)定保存 3 個月,在 -20 °C 下可穩(wěn)定保存 6 個月,。
質(zhì)量控制:每批病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑均經(jīng)過無菌測試,,并成功提高病毒顆粒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。該套件僅供研究使用,。不適用于診斷或治療過程,。
方案
1. 第 1 天,在 24 孔板的細(xì)胞培養(yǎng)基中每孔接種 50,000 個細(xì)胞,。
2. 第 2 天細(xì)胞應(yīng)達(dá)到 50% 至 70% 匯合度,。
3. 吸出細(xì)胞中的培養(yǎng)基。
4. 將培養(yǎng)基與病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑混合至 1X 終濃度,。例如:將 1 µl 增強(qiáng)劑添加到 500 µl 培養(yǎng)基中,,然后轉(zhuǎn)移到每個孔中。
5. 將病毒添加到每個孔中并搖動板以充分混合,??蛇x:以不同的 MOI(5、10 和 20 等)將病毒添加到不同的孔中,,以優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)。
6. 在第 5 天,,即轉(zhuǎn)導(dǎo)后約 72 小時,,如果病毒構(gòu)建體具有 GFP 等報(bào)告基因,則檢查細(xì)胞的報(bào)告基因表達(dá)情況,。
7. 吸出培養(yǎng)基,。用 PBS 清洗細(xì)胞。
8. 在每個孔中添加 100 µl 裂解緩沖液,。
9. 根據(jù)滴定試劑盒給出的方案滴定病毒,。
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