厭氧菌在有氧的情況下不能生長,。要培養(yǎng)厭氧菌，創(chuàng)造一個無氧的環(huán)境,。通常用培養(yǎng)基中加入還原劑,，或用物理、化學方法去除環(huán)境中的游離氧,，以降低氧化還原電勢,。如皰肉培養(yǎng)基、硫基乙酸鈉培養(yǎng)基,，牛心腦浸液培養(yǎng)基等,。常用的厭氧培養(yǎng)方法有許多，可根據(jù)實際情況選用,。
　　1．厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養(yǎng)基試管,，可放入?yún)捬醺變扰囵B(yǎng)，厭氧缸是普通的干燥缸,，用物理化學的方法使缸內造成厭氧環(huán)境,，從而將厭氧菌培養(yǎng)出來。
　　2．厭氧袋（Bio-bag）即在塑料袋內造成厭氧環(huán)境來培養(yǎng)厭氧菌,。塑料袋透明而不透氣,，內裝氣體發(fā)生管（有硼**鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿）、美蘭指示劑管,、鈀催化劑管,、干燥劑。放入已接種好的平板后,，盡量擠出袋內空氣,，然后密封袋口。先折斷氣體發(fā)生管,，后折斷美蘭指示劑管,，命名袋內在半小時內造成無氣環(huán)境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態(tài),，可以孵育,。
　　3．厭氧手套箱（Anaerobie glove box）即厭氧培養(yǎng)箱。它是一個密閉的大型金屬箱,，箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,，板上裝有兩個手套，可通過手套在箱內進行操作,，故名,。箱側有一交換室,，具有內外二門，內門通箱內先關著,。欲放物入箱,，先打開外門，放入交換室,，關上外門進行抽氣和換氣（H2,，CO2，N2）達到厭氧狀態(tài),，然后手伸入手套把交換室內門打開,，將物品移入箱內，關上內門,。箱內保持厭氧狀態(tài),，也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調節(jié)溫度,，本身是孵箱或孵箱即附在其內,，還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落，這種厭氧箱適于作厭氧細菌的大量培養(yǎng)研究,，大量培養(yǎng)基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗,。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣,、厭氧環(huán)境和溫度等均系自動調節(jié),。
4.厭氧盒：原理同厭氧袋，有成品銷售,。
5.生物耗氧法：在一密閉的容器內放以生物（多是植物）,，消耗氧氣，同時產(chǎn)生CO2,，供細菌生長用,。我沒見過。
6.焦性末食子酸法：在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙,，均勻撒上焦性末食子酸,，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面,，用融化的白蠟封邊,，造成一個封閉空間。焦性末食子酸與堿反應后耗氧,。該法用于厭氧不嚴格的厭氧菌的培養(yǎng),，簡單。如有梭狀芽孢桿菌,。
7.皰肉培養(yǎng)基：本身就是一個不需特殊設備的厭氧培養(yǎng)法,。皰肉和肉湯裝入大試管，液面封凡士林,，造成無氧環(huán)境,。
操作室厭氧環(huán)境形成：按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內放入二個無毒塑料袋,。通電源開照明燈,，開控溫儀，調節(jié)所需溫度及安全溫度,。操作室內放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉),。關緊取樣室內外門，并抽真空校驗,。操作室內次置換（氮氣置換）：先用橡皮管插入操作室內進氣口,，另一頭插入塑料袋。接通氮氣進氣路,，打開氮氣控制閥,，使二只塑料袋充足氮氣，然后扎緊袋口,。把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊,。把塑料袋內氮氣漸漸地放于操作室內，至全部放出,。操作室D二次置換（氮氣置換）重復一 次充氮過程,，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。操作室D三次置換（混合氣體置換）：（混合氣體配比為：N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%）調換氣路打開混合氣道通閥門進氣,，充氣時要隨時腳踏開關開閉排氣,。混合氣充滿塑料袋后,，關掉混合氣直通閥（三通閥）,，使混合氣經(jīng)過流量計輸入操作并調整流量計，流量為每分鐘10毫升左右,。把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內,。通過三次換氣后，操作室內氣體含氧量已處于微量狀態(tài),。操作室內打開鈀粒除氧劑,，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一 小時后打開美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀察其變色情況,，不變色為操作室內達到厭氧環(huán)境,。開紫外線滅菌燈，室內進行滅菌處理。滅菌時間自定,。