產(chǎn)品名稱：大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）試劑盒

產(chǎn)品介紹：

本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）的含量,。

有效期：6個月

保存條件：2-8℃

本試劑盒僅供科研使用,，不得用于臨床診斷。

實驗原理：

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度。

樣本處理及要求：

1. 血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,，然后1000×g離心20 分鐘,，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融,。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,，取上清即可檢測,，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融,。
3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比,，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,，并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融,。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,，取上清檢測。

4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融,。

注：標本溶血會影響最后檢測結果,，因此溶血標本不宜進行此項檢測。