組織自發(fā)熒光淬滅劑（AutoFluo Quencher）產(chǎn)品說(shuō)明

時(shí)間：2024/7/19閱讀：363

產(chǎn)品名稱：組織自發(fā)熒光淬滅劑（AutoFluo Quencher）

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

許多組織會(huì)產(chǎn)生可透過(guò)各種波長(zhǎng)濾光片的內(nèi)源性自發(fā)熒光,，顯著干擾抗體標(biāo)記熒光觀察甚至導(dǎo)致免疫組化染色失敗,。自發(fā)熒光淬滅試劑中的離子可通過(guò)碰撞方式捕獲自發(fā)熒光光源分子發(fā)出的電子,，阻止該電子從激發(fā)態(tài)回歸基態(tài)和能量釋放,，從而淬滅自發(fā)熒光,。采用優(yōu)化的孵育時(shí)間,，可以最大限度地消除自發(fā)熒光而不明顯影響抗體標(biāo)記的熒光,。

適用：各種組織,、細(xì)胞免疫熒光染色的自發(fā)熒光消除。特別適用于神經(jīng)組織自發(fā)熒光淬滅,。

儲(chǔ)存：4 oC 避光,。

使用方法：

以下步驟在免疫熒光組化染色完畢之后(而非在熒光染色完畢之前)執(zhí)行。對(duì)特定的組織和細(xì)胞類型,，必需優(yōu)化孵育時(shí)間以便最大限度淬滅自發(fā)熒光而不明顯影響抗體標(biāo)記的熒光(步驟 2),。請(qǐng)仔細(xì)閱讀后面的說(shuō)明。

1. 吸去 PBS 或相應(yīng)洗滌緩沖液,，用蒸餾水短暫沖洗組織切片或細(xì)胞培養(yǎng)板中的細(xì)胞,。

2. 加入適量但充足的自發(fā)熒光淬滅劑覆蓋組織切片或瓶皿中的細(xì)胞。室溫孵育 10-90min,。

3. 吸去自發(fā)熒光淬滅劑,，用蒸餾水短暫沖洗。

4. 吸去蒸餾水,，用 PBS 覆蓋組織切片或位于細(xì)胞培養(yǎng)板中的細(xì)胞,。

5. 封片。建議使用抗熒光衰減封片劑,。該封片劑可防止抗體標(biāo)記熒光衰退,。

6. 熒光顯微鏡觀察。

說(shuō)明：

1. 不同物種不同類型組織的自發(fā)熒光具有不同的特征,，使用組織自發(fā)熒光淬滅劑的效果可能會(huì)有差別,。另外，任何針對(duì)自發(fā)熒光的淬滅,，將會(huì)在一定程度上降低抗體熒光強(qiáng)度,。所幸的是該試劑對(duì)自發(fā)熒光的淬滅程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出抗體熒光強(qiáng)度的降低，因而能在二者之間獲得較好的平衡,。由于不很清楚的原因,，本試劑對(duì)于消除腦脊髓神經(jīng)組織的自發(fā)熒光具有更好的效果,。

2. 為獲得最佳效果，必需優(yōu)化孵育時(shí)間以便最大限度淬滅某一特定組織的自發(fā)熒光而不明顯影響抗體標(biāo)記的熒光(步驟 2),。重要的標(biāo)本應(yīng)在確定最佳孵育時(shí)間之后使用本試劑,。進(jìn)行優(yōu)化時(shí)，可取數(shù)張組織切片或位于培養(yǎng)皿中的細(xì)胞,，在免疫熒光組化染色完畢之后加入組織自發(fā)熒光淬滅劑,，孵育 5、10,、30,、60、90 分鐘等不同時(shí)間,，沖洗后觀察熒光,。如果組織自發(fā)熒光仍然很強(qiáng)，可延長(zhǎng)孵育時(shí)間,；如果孵育時(shí)間小于 10 分鐘而熒光消退十分明顯,，可將孵育時(shí)間減少為 1-5 分鐘，或者取少量的組織自發(fā)熒光淬滅劑加等份的雙蒸水稀釋,，然后孵育 10-90 分鐘進(jìn)行優(yōu)化,。

3. 組織自發(fā)熒光淬滅劑必須在完成免疫熒光組化染色后使用，否則將嚴(yán)重降低抗體熒光,。

南京億迅生物科技有限公司出品的各類細(xì)胞生物學(xué)試劑,，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)格實(shí)惠,，在國(guó)內(nèi)各科研院所和高校擁有良好的品譽(yù),。

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