改良油紅O染色液

產(chǎn)品簡介:

脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪,、類脂及其衍生物的總稱,，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有機溶劑(如乙醇等),。人體的脂肪主要有兩種:1,、儲存脂肪，如中性脂肪,，主要分布于皮下,、腎、胰腺等部位;2,、結(jié)構(gòu)脂肪,，如類脂(磷脂、糖脂,、膽固醇等),，主要分布于細(xì)胞內(nèi)，中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,，呈中性,，中性脂肪是儲存能量的方式之一，在氧化時釋放出能量,。中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹工,、蘇丹血、蘇丹IV,、蘇丹黑 B,、油紅0 法等，傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料,，最近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅0 更適合脂肪的染色;油紅 0 是很強的脂溶劑和染脂劑,，較易與甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀與磷脂結(jié)合力稍差，其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用,，借溶液作用使脂肪染色，染料在冰凍切片內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較原溶劑中的溶解度更大,，所以在染色時染料就從有機溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色,。改良油紅 0染色液主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著，常發(fā)生于肝、腎,、心等實質(zhì)臟器的脂肪變性,，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)中性脂肪滴;鑒別和診斷脂肪組織中所發(fā)牛的腫瘤及其性質(zhì)，脂肪的陽性染色結(jié)果呈黃至紅色,，但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定,。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途,。

自備材料:

1,、60%異丙醇、蒸餾水,、甘油明膠或阿拉伯糖膠

操作步驟(僅供參考):

1,、 冰凍切片厚度 6~10um，不固定或 10%福爾馬林固定 10min 后水洗,，蒸餾水稍沖洗

2,、 入 60%異丙醇浸洗 20~30s。

3,、入改良油紅 0 染色液(加蓋),，密閉染色 10~15min。

4,、入 60%異丙醇稍洗以便去除染液,，蒸餾水稍微清洗。

5,、入 蘇木素染色液復(fù)染2~5min,。

6、自來水漂洗 10min 至核為藍(lán)色,。

7,、蒸餾水稍微清洗，濾紙吸干周圍水分

8,、水溶性封固劑(甘油明膠或阿拉伯糖膠)封固,，鏡檢。

染色結(jié)果：

中性脂肪：橙紅色或橘紅色,，細(xì)胞核：藍(lán)色

注意事項:

1,、由于脂肪易溶于有機溶劑，組織不能采用含有機溶劑的固定液(如需要固定可采用 10%福爾馬林),，亦不采用石蠟切片,，需用冰凍切片或碳蠟切片。

2,、作脂肪染色的冰凍切片不可太薄,，過薄的切片常會使脂質(zhì)丟失,。

3.、油紅 0染色工作液不穩(wěn)定,，易產(chǎn)生沉淀,，影響染色觀察，可按需配制后采用靜置20~40min 或 3000rpm 離心 10 分鐘取上清備用,。

4,、如果 60%的異丙醇不易獲得，亦可采用 70%的乙醇,。

5,、蘇木素染色液復(fù)染時間不能過長。

6,、染色結(jié)果不能長久保存,，應(yīng)盡快觀察及照相。

7,、水溶性封固劑封固的樣本,，保存時間不長;如需長期保存，可以在蓋玻片與載玻片交界的邊緣用中性樹膠封閉,。

8,、試劑開封后請盡快使用，以防影響后續(xù)實驗效果,。

有效期：12個月有效;常溫運輸,，按要求保存。