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改良油紅O染色液
產(chǎn)品簡介:
脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪,、類脂及其衍生物的總稱,其共同的物理特性是不溶于水,,易溶于有機(jī)溶劑(如乙醇等),。人體的脂肪主要有兩種:1、儲(chǔ)存脂肪,,如中性脂肪,,主要分布于皮下、腎,、胰腺等部位;2,、結(jié)構(gòu)脂肪,如類脂(磷脂,、糖脂,、膽固醇等),主要分布于細(xì)胞內(nèi),,中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,,呈中性,中性脂肪是儲(chǔ)存能量的方式之一,,在氧化時(shí)釋放出能量,。中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹工、蘇丹血,、蘇丹IV,、蘇丹黑 B、油紅0 法等,,傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料,,最近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅0 更適合脂肪的染色;油紅 0 是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑,較易與甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀與磷脂結(jié)合力稍差,,其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用,,借溶液作用使脂肪染色,染料在冰凍切片內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較原溶劑中的溶解度更大,,所以在染色時(shí)染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色,。改良油紅 0染色液主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著,,常發(fā)生于肝、腎,、心等實(shí)質(zhì)臟器的脂肪變性,,細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)中性脂肪滴;鑒別和診斷脂肪組織中所發(fā)牛的腫瘤及其性質(zhì),脂肪的陽性染色結(jié)果呈黃至紅色,,但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定,。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途,。
自備材料:
1,、60%異丙醇、蒸餾水,、甘油明膠或阿拉伯糖膠
操作步驟(僅供參考):
1,、 冰凍切片厚度 6~10um,不固定或 10%福爾馬林固定 10min 后水洗,,蒸餾水稍沖洗
2,、 入 60%異丙醇浸洗 20~30s。
3,、入改良油紅 0 染色液(加蓋),,密閉染色 10~15min。
4,、入 60%異丙醇稍洗以便去除染液,,蒸餾水稍微清洗。
5,、入 蘇木素染色液復(fù)染2~5min,。
6、自來水漂洗 10min 至核為藍(lán)色,。
7,、蒸餾水稍微清洗,濾紙吸干周圍水分
8,、水溶性封固劑(甘油明膠或阿拉伯糖膠)封固,,鏡檢。
染色結(jié)果:
中性脂肪:橙紅色或橘紅色,,細(xì)胞核:藍(lán)色
注意事項(xiàng):
1,、由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑,,組織不能采用含有機(jī)溶劑的固定液(如需要固定可采用 10%福爾馬林),,亦不采用石蠟切片,需用冰凍切片或碳蠟切片,。
2,、作脂肪染色的冰凍切片不可太薄,,過薄的切片常會(huì)使脂質(zhì)丟失。
3.,、油紅 0染色工作液不穩(wěn)定,,易產(chǎn)生沉淀,影響染色觀察,,可按需配制后采用靜置20~40min 或 3000rpm 離心 10 分鐘取上清備用,。
4、如果 60%的異丙醇不易獲得,,亦可采用 70%的乙醇,。
5、蘇木素染色液復(fù)染時(shí)間不能過長,。
6,、染色結(jié)果不能長久保存,應(yīng)盡快觀察及照相,。
7,、水溶性封固劑封固的樣本,保存時(shí)間不長;如需長期保存,,可以在蓋玻片與載玻片交界的邊緣用中性樹膠封閉,。
8、試劑開封后請(qǐng)盡快使用,,以防影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)效果,。
有效期:12個(gè)月有效;常溫運(yùn)輸,按要求保存,。
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