詳細介紹
PCR實驗室建設四要素
1 試劑準備區(qū)
用于試驗試劑的準備。該區(qū)域為正壓,,目的是防止污染物質溢入,。該區(qū)域內部又可分為3個區(qū)域:普通提取試劑的準備區(qū)、PCR試劑準備區(qū)和PCR主反應液準備區(qū),。在普通提取試劑的準備區(qū)內準備一些樣品核酸提取時所需的裂解液,、提取液等;PCR試劑準備區(qū)用于PCR試劑的制備和保存。例如準備引物,、探針等PCR試劑,。為了防止交叉污染,避免反復冷凍和解凍,,試劑存貯溶液應該被平均為小的工作體積,,儲存在這個房間以備后用:PCR主反應液準備區(qū)將進行主反應混合液(除了樣品。所有PCR所需試劑的混合)添加到PCR管的操作,。重要提示:不能將其它房間的材料(包括擴增,、模板和目標核酸或陽性對照、供應品,、或設備)帶進試劑準備區(qū),。
2 樣品準備區(qū)
該區(qū)域無壓力設置要求。該區(qū)域是用于對樣品進行分樣,,將樣品進行研磨,、粉碎、勻漿的區(qū)域,。由于在這些粉碎,、研磨和勻漿處理過程中會產生氣溶膠,因此,存在陽性樣品污染后續(xù)操作的可能性,。該區(qū)域與后面的區(qū)域應嚴格隔離,,應放在與后面的三個區(qū)域隔開的獨立的房間中。在樣品準備區(qū)內還可設立一個專用的封閉區(qū)或房間用于樣品的接收和儲存,。這個房間可以放置冰箱用于樣品儲存,,應該和樣品準備區(qū)其它區(qū)域隔離開。樣品準備區(qū)域的人員不得進入試劑準備區(qū),。
3 核酸提取區(qū)
核酸提取區(qū)是進行樣品核酸提取的區(qū)域,。該區(qū)域為負壓,目的是防止核酸溢出造成污染,。樣品準備區(qū)又包括從樣品中進行核酸提取和純化的區(qū)域以及將核酸加到包含PCR主反應混合液管中的操作區(qū)域,。添加完樣品后,PCR管的蓋子要盡可能快地蓋好,。使用PCR板和膠蓋時,,陽性對照和含目標序列的樣品要與待測樣本分開操作,以避免模板添加時造成交叉污染,。
4 擴增和產品檢測區(qū)
該區(qū)域是用來進行PCR擴增和PCR分析的,。PER儀放置在這個區(qū)域。房間保持負壓,,目的是防止核酸溢出,。在該區(qū)域人員一定要一直穿戴工作服和手套,在離開房間前脫去,,防止擴增子污染其它地點,。所有用于擴增和產品檢測的設備要用于這個房間。PCR分析]二作也設置在該區(qū)域,。實驗室應盡可能把這些活動分隔在不同區(qū)域或不同房間。以降低擴增產物的污染風險,。如果沒有條件在該區(qū)域設立負壓,,此區(qū)域必須建立排風裝置。
建設 醫(yī)院PCR檢測實驗室 無菌室 設計 裝修——建設 醫(yī)院PCR檢測實驗室 無菌室 設計 裝修