詳細(xì)介紹
產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 品牌 | |
KFX-201 | KOD FX NEO | TOYOBO | |
fsq-301 | CDNA SYNTHESIS KITS | toyobo | |
NKB-201 | Can Get Signal ®Immunoreaction Enhancer Solution | toyobo | |
KOD-401 | KOD -Plus-Neo | toyobo | |
KOD-401 | KOD_Plus_Neo高保真PCR酶 | Toyobo | |
SCQ-401 |
| toyobo | |
KOd-401 | KOD_Plus_Neo高保真PCR酶 | Toyobo |
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描述
KOD FX Neo是基于超嗜熱古生熱球菌kodakaraensis KOD1(1)(2)的DNA聚合酶,。與傳統(tǒng)的PCR酶相比,KOD FX Neo具有更高的效率和延伸能力,。特別是,,KOD FX Neo從原始樣本中獲得了更大的擴(kuò)增成功,。
KOD FX Neo是以前的KOD FX(代碼KFX-101)的改進(jìn)版本,。該產(chǎn)品包含*的“伸長率增強(qiáng)劑”,可抑制“高原效應(yīng)”,,從而提高伸長率和功能,。
KOD FX Neo酶溶液包含兩種類型的抗-KOD DNA聚合酶抗體,它們可抑制聚合酶和3'→5'核酸外切酶活性,,因此可進(jìn)行熱啟動(dòng)PCR(3),。KOD FX Neo由于其3'→5'生成平末端PCR產(chǎn)品
特征
KOD-Plus- Neo的PCR保真度比Taq DNA聚合酶高80倍,。
與傳統(tǒng)PCR相比,“延伸增強(qiáng)劑”可實(shí)現(xiàn)更高的擴(kuò)增效率和延伸能力(距人類基因組DNA高達(dá)24 kb),。
PCR延伸步驟僅需30秒/ kb,。
兩步循環(huán)條件可用于≥20 mer引物(解鏈溫度,Tm>63ºC)的擴(kuò)增,。
應(yīng)用領(lǐng)域
基因分型(從粗樣品中
擴(kuò)增)
-全血,,培養(yǎng)細(xì)胞,老鼠尾巴,,老鼠腳趾,,植物和食物等
。-來自老鼠尾巴,,植物,,魚翅,土壤等的各種裂解物
-革蘭氏陽性細(xì)菌,,真菌,,酵母菌等。
快速模式可有效放大困難目標(biāo)(高G / C,,長),。
高保真PCR
資源
攜帶克隆的KOD DNA聚合酶基因的大腸桿菌菌株
單位定義
一個(gè)單位定義為在75℃30分鐘內(nèi)將10納摩爾dNTP摻入酸不溶性物質(zhì)的酶的量。
儲存情況
50 mM Tris-HCl(pH8.0),,0.1 mM EDTA,,1 mM DTT,0.001%Tween 20,、0.001%Nonidet P-40,、50%甘油
儲存在-20ºC
組件
該試劑包含200個(gè)反應(yīng)的以下成分,總反應(yīng)體積為50 µL,。
KOD FX Neo(1.0 U / µL)* 200 µL×1
2個(gè)PCR緩沖液用于KOD FX Neo ** 1.7毫升×3
2毫米dNTP 1毫升×2
*該酶溶液包含抗-KOD DNA聚合酶抗體,,可中和聚合酶和3'→5'核酸外切酶活性。
**用于KOD FX Neo的2x PCR緩沖液在-20ºC儲存時(shí)為液體(未冷凍),。盡管它會在-20ºC以下凍結(jié),,但質(zhì)量不會受到影響。
典型的PCR反應(yīng)設(shè)置
零件 卷數(shù) 終濃度
PCR級水 X微升 1倍
用于KOD FX Neo的2x PCR緩沖液 25微升 1倍
2mM dNTPs * 10微升 每個(gè)0.4 mM
10pmol / µL底漆#1 1.5微升 0.15–0.3 µM
10pmol / µL底漆#2 1.5微升 0.15–0.3 µM
模板DNA Y微升
基因組DNA≤200 ng / 50 µL
質(zhì)粒DNA≤50 ng / 50 µL
cDNA≤200 ng(RNA當(dāng)量)/ 50 µL
粗樣品≤0.5–2 µL / 50 µL(請參閱[7])
KOD FX Neo(1.0U / µL) 1微升 1.0 U / 50微升
總反應(yīng)量 50微升
*該酶溶液包含抗-KOD DNA聚合酶抗體,,可中和聚合酶和3'→5'核酸外切酶活性,。
**用于KOD FX Neo的2x PCR緩沖液在-20ºC儲存時(shí)為液體(未冷凍)。盡管它會在-20ºC以下凍結(jié),,但質(zhì)量不會受到影響,。
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