| 北京華新康信生物科技有限公司 |
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2020年這個(gè)特殊的一年,，病毒給大家的生產(chǎn)生活帶來了的重大影響，
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在2020年這個(gè)特殊的一年里,，病毒給大家的生產(chǎn)生活帶來了的重大影響，
5月-10月疫情期間,，北京華新康信生物科技有限公司幾百種代理品牌進(jìn)行產(chǎn)品*活動(dòng),，大力讓利新老客戶，保質(zhì)保量,，歡迎咨詢,。疊氮化NA
MARCKSL1抗體1出版物
兔多克隆| 貨號(hào)：11422-1-AP
物種特異性：人類，老鼠
在以下位置檢測(cè)到正白平衡：人腦組織
在以下方面檢測(cè)到陽性IHC：人肺癌組織,，人肝癌組織,，人胰腺癌組織
經(jīng)過測(cè)試的應(yīng)用
應(yīng)用范圍：WB，IHC,，ELISA
應(yīng)用程序未經(jīng)測(cè)試,？請(qǐng)參閱我們的保證
注意：建議使用pH 9.0的TE緩沖液進(jìn)行抗原回收；（*）或者,，可以用pH 6.0的檸檬酸鹽緩沖液進(jìn)行抗原修復(fù)
推薦稀釋度：
白平衡：1：500-1：1000
IHC：1：20-1：200
取決于樣品,，在“驗(yàn)證”選項(xiàng)卡中檢查數(shù)據(jù)
資源：兔子
純化方法：抗原親和純化
同型：IgG抗體
存儲(chǔ)：具有0.1％疊氮化NA和50％甘油pH 7.3的PBS。儲(chǔ)存于-20 Ô C. 等分是不必要的-20 ö下儲(chǔ)存,。
免疫原MARCKSL1融合蛋白Ag1967
全名：類馬克1
計(jì)算分子量：195aa,，20 kDa
觀察分子量：48 kDa的
GenBank登錄號(hào)：BC007904
基因編號(hào)（NCBI）：65108
基因符號(hào)MARCKSL1
同義字F52，Mac MARCKS,，MACMARCKS,，MARCKS like 1，MARCKS like protein 1,，MARCKS related protein,，MARCKSL1，MLP,，MLP1,，MRP
MARCKS樣蛋白1（MARCKSL1）在神經(jīng)組織中廣泛表達(dá)，也被稱為MARCKS樣蛋白（MLP）或MARCKS相關(guān)蛋白（MRP）,，屬于MARCKS家族,，是高度酸性的肉豆蔻酰化家族底物廣泛分布在包括巨噬細(xì)胞在內(nèi)的各種細(xì)胞類型中,。由于SDS凝膠上的異常遷移或磷酸化,，該蛋白質(zhì)的計(jì)算分子量為20 kDa，表觀分子量為42-48 kDa。MARCKSL1的遺傳破壞導(dǎo)致神經(jīng)管閉合缺陷,，取決于肌動(dòng)蛋白功能,，細(xì)胞形狀和細(xì)胞遷移的協(xié)調(diào)控制的事件。人們認(rèn)為MARCKSL1調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白的細(xì)胞骨架,，從而參與主要的細(xì)胞反應(yīng),，如吞噬作用，分泌,，運(yùn)動(dòng),，有絲分裂和膜運(yùn)輸。
免疫印跡和免疫沉淀法: 細(xì)胞裂解物的制備: 將 ripa 緩沖液加入細(xì)胞(35mm 的培養(yǎng)皿中加入100l,，60mm 的培養(yǎng)皿中加入200l,，100mm 的培養(yǎng)皿中加入500l) ,，同時(shí)將培養(yǎng)皿置于冰上,。 刮去電池，輕輕地?fù)u動(dòng)懸掛,，或者在冰冷的房間里用搖桿或者軌道振動(dòng)器搖動(dòng)15分鐘來溶解電池,。 在冰水中用浴用聲波儀進(jìn)行聲波處理，直到樣品不再粘稠,。 將細(xì)胞在12000克的溫度下4 °c 離心5分鐘,，取出顆粒。 把上清液移到新鮮的管子里,。 細(xì)胞裂解液的終濃度為2-3克 / 升,。 對(duì) wb 來說，在裂解液中加入4個(gè) sds 停止緩沖液,，終濃度為1個(gè) sds,。 免疫印跡法: 1。 煮沸10分鐘后,，20-50升樣品將載入 sds 頁面,。 對(duì)于大多數(shù)蛋白質(zhì)來說，建議以每道負(fù)荷量30-80克總?cè)芙獾鞍踪|(zhì),，因?yàn)榧?xì)胞中80% 的蛋白質(zhì)種類濃度非常低,。 圖2。 將凝膠浸泡在免疫印跡轉(zhuǎn)移緩沖液中,。 聚偏氟乙烯膜被推薦用于大多數(shù)蛋白質(zhì),。 將薄膜浸入甲醇中1-2分鐘，將薄膜在轉(zhuǎn)移緩沖液中浸泡10分鐘,，然后將其放置在一疊厚厚的浸過緩沖液的濾紙上,。 然后用另一堆浸滿緩沖液的過濾紙蓋上。 把轉(zhuǎn)移裝置蓋上。 凝膠應(yīng)該在膜的負(fù)面,。 圖3,。 以每平方厘米1毫安的電流跑90分鐘。 圖4,。 在室溫下或在4 °c 的溫度下用緩沖液將細(xì)胞膜孵育1小時(shí),。 用清洗緩沖液清洗隔膜35分鐘。 5. 用阻斷緩沖液稀釋一級(jí)抗體,。 在室溫下將細(xì)胞膜培養(yǎng)1.5小時(shí),。 用清洗緩沖液清洗隔膜35分鐘。 圖6,。 用阻斷緩沖液稀釋二級(jí)抗體,。 在室溫下將細(xì)胞膜培養(yǎng)1小時(shí)。 用清洗緩沖液清洗隔膜35分鐘,。 圖7,。 用清洗緩沖液清洗隔膜310分鐘。 圖8,。 用 ecl 顯色,。
免疫沉淀法: 1。 將200-350升的細(xì)胞裂解液(含有1-3毫克總蛋白質(zhì))轉(zhuǎn)移到微濾管中,。 加入150-300升培養(yǎng)液和1-4克一級(jí)抗體到細(xì)胞(或預(yù)先清除的)裂解液中,。 JIA抗體濃度應(yīng)通過滴定法確定，用對(duì)照 igg (對(duì)應(yīng)于一抗源)建立陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn),。 在4 °c 的環(huán)境中輕輕搖晃孵化箱2-4小時(shí)或過夜,。3。 加入50升蛋白 a 或克瓊脂糖漿以獲得免疫復(fù)合物,。在4 °c 下輕輕搖動(dòng)混合物1-4小時(shí),。 取下端蓋，必要時(shí)將上清液從旋轉(zhuǎn)塔底部釋放出來,，再懸浮混合物以提高流速,。 用1湯匙含1個(gè)蛋白酶抑制劑的量清洗珠子5次。 后一次清洗后,，用500克離心機(jī)將旋轉(zhuǎn)塔在4c 下離心30秒,，用收集管收集過濾液，然后丟棄,。 將自旋柱置于新鮮的微濾管中,，并將洗脫液集中起來。 用40l 洗脫緩沖液洗脫,，離心8000ー10000g,，在4c 條件下洗脫1min，再用新的40l 洗脫緩沖液洗脫一次。 在洗脫液中加入10l 堿中和緩沖液和30l4樣品緩沖液,，95-100c 加熱5分鐘,。 存儲(chǔ)在零下20攝氏度或加載20-40升在 sds-頁面，并檢測(cè)它由寬帶,。,、
組織培養(yǎng)細(xì)胞免疫熒光方案: 1。 將細(xì)胞培養(yǎng)在小的圓形蓋玻璃上,。 4% pfa 或有機(jī)溶劑固定細(xì)胞20分鐘在4 c (如果你使用有機(jī)溶劑固定,，只需跳過步驟3，直接進(jìn)入步驟4),。 將玻璃倒入0.2% ttiton x-100-pbs 中5分鐘,。4。 用 bsa-pbs 在室溫下封閉細(xì)胞1h 或在4 °c 下封閉過夜,。 5. 在蓋玻片上加入50升特異性初級(jí)抗體,，在室溫下的潮濕容器中培養(yǎng)1小時(shí)。 在每個(gè)蓋玻片上加入50升熒光標(biāo)記的二級(jí)抗體,，室溫下在黑暗中的潮濕容器中孵育1小時(shí),。 用15% 的甘油或者小量的水溶液裝在載玻片上,。8,。 在邊緣用指甲油封住YIN唇。石蠟包埋組織切片的免疫組織化學(xué):,。 二甲苯分別用兩種方法分離載玻片40分鐘和20分鐘,。 轉(zhuǎn)移載玻片到* 酒精，95% 酒精,，80% 酒精,，60% 酒精和 ddh2o5分鐘。 將載玻片放入裝有抗原恢復(fù)緩沖液的容器中,，中間放置微波幾分鐘(700瓦烤箱) ,，讓恢復(fù)液在室溫下冷卻。 用 tbs 清洗25分鐘,。 在3% h2o2溶液中培養(yǎng)10分鐘,，阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性。 用 tbs 清洗25分鐘. 7,。 將5-10% 的山羊血清置于 tbs 液中室溫封閉30分鐘,。 排水滑梯幾秒鐘(不要沖洗) ，擦拭圓形部分,。9,。 應(yīng)用 tbs 的一級(jí)抗體。 在室溫下孵化1小時(shí)或在4 °c 下孵化一夜。10,。 用湯匙沖洗25分鐘,。 在室溫下應(yīng)用預(yù)想的二級(jí)抗體30分鐘。 用 tbs 沖洗25分鐘13,。 在室溫下用色原顯影,，在顯微鏡下觀察。14,。 用流動(dòng)的自來水沖洗5分鐘,。 在市長(zhǎng)的蘇木精浴中反染30-60秒。 在水中洗7-8次,，然后自來水3分鐘,。17。 分別用60% ,、80% ,、95% 和* 的酒精脫水5分鐘。 轉(zhuǎn)移到二甲苯5分鐘,。 空氣30分鐘,。19。安裝
5月-10月疫情期間,，北京華新康信生物科技有限公司進(jìn)行產(chǎn)品大力讓利活動(dòng),，代理Proteintech品牌。北京華新康信生物科技有限公司是Proteintech品牌代理商,。北京華新康信專業(yè)代理各大產(chǎn)品,，系列齊全，大部分現(xiàn)貨,，保證質(zhì)量,，真誠(chéng)合作，歡迎您咨詢,，我們將竭盡全力滿足您的需求,。選購Proteintech代理，您選北京華新康信生物科技有限公司,，北京華新康信生物科技有限公司專業(yè)代理Proteintech品牌,，Proteintech代理 北京華新康信生物科技有限公司是（Proteintech）（Proteintech代理）（Proteintech專業(yè)代理）（Proteintech北京代理）（Proteintech上海代理）（Proteintech代理），歡迎電話咨詢,，我們的產(chǎn)品,，將會(huì)給您帶來意想不到的成效，歡迎電話咨詢,，合作共贏,。
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