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產(chǎn)品簡介
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雙鏈特異性核酸酶
目錄號EA001; EA002; EA003; EA008
-選擇性切割DNA-RNA雜交雙鏈體中的ds DNA和DNA-
區(qū)分*匹配和
非匹配的短雙鏈體-對ss DNA和RNA無活性
-熱穩(wěn)定
-被EDTA抑制
雙鏈特異性核酸酶（DSN）是一種從紅金（Kamchatka）蟹的肝胰腺中純化的酶（Shagin 等,，2002）,。DSN對在DNA-RNA雜交雙鏈體中裂解雙鏈（ds）DNA和DNA表現(xiàn)出強烈的偏愛，并且實際上對單鏈（ss）DNA或單鏈或雙鏈RNA無活性,。此外,，該酶能夠區(qū)分*匹配和不*匹配的短DNA雙鏈體。DSN被廣泛用于全長富集的cDNA標(biāo)準化（Zhulidov 等，2004; Bogdanova 等,，2011a）和用于下一代測序的標(biāo)準化RNA-seq文庫的構(gòu)建（（Christodoulou 等,。（2011年），Illumina DSN標(biāo)準化協(xié)議）,。已批準的DSN應(yīng)用列表還包括基因組DNA的標(biāo)準化（Shagina 等,，2010），cDNA耗竭和核糖體cDNA耗竭（Bogdanova 等,，2009,； Bogdanova 等，2011b,； Yi 等,，2011），減去cDNA（Peng 等,，2008）,，SNP檢測（Shagin 等，2002; Liu 等,，2011），構(gòu)建無重復(fù)的FISH探針（Swennenhuis 等,，2012）,，多重?zé)晒鈾z測miRNA （Yin 等人，2012）,，定量端粒突出端測定（Zhao 等人,，2008； Zhao 等人,，2008）,。（2011年）等。
產(chǎn)品 貓,。＃ 描述 尺寸 價錢 使用手冊（PDF）
雙鏈特異性核酸酶,，凍干 來自Red King（Kamchatka）蟹肝胰腺的熱穩(wěn)定核酸酶，強烈希望裂解雙鏈DNA和DNA-RNA雜交雙鏈體中的DNA 10U DSN用戶手冊
EA003 10U evrogen
EA001 50U evrogen
EA002 100 U evrogen
EA008 1000U evrogen
使用Shagin 等人的改良方案從Red King（Kamchatka）蟹肝胰腺中純化DSN ,。,，2002。使用改良的Kunitz測定法（Kunitz,，1950）測量DNAase活性,，其中單位定義定義為：添加到50μg/ ml小牛胸腺DNA中的DSN量，導(dǎo)致每分鐘0.001吸收單位增加,?；钚詼y定是在25°C，含有5mM MgCl 2的 50 mM Tris-HCl緩沖液（pH 7.15）中進行的。
運輸和儲存條件：
套件的所有組件均可在環(huán)境溫度下運輸,。到達后,，所有組件都必須在-20°C下存儲。
研究產(chǎn)品：
-光誘導(dǎo)的高對比度光轉(zhuǎn)換
-可通過流式細胞儀或熒光顯微鏡輕松檢測
-無需輔因子,，底物或化學(xué)染色
-適用于長期追蹤細胞事件
可光活化的熒光蛋白（PAFP）代表了監(jiān)視細胞事件的*工具,。PAFP響應(yīng)于特定光的照射而改變光譜特性。近年來,，PAFP已用于時空方式光學(xué)標(biāo)記和跟蹤活細胞,，細胞器和細胞內(nèi)分子的新方法的開發(fā)。PAFP成為超分辨率成像技術(shù)*的工具,。此外,，PAFPs為研究細胞生理學(xué)開辟了新的可能性，特別是,，它們允許仔細確定蛋白質(zhì)的半衰期,。
應(yīng)用領(lǐng)域
跟蹤細胞，細胞器和蛋白質(zhì)的
運動PAFPs比光漂白技術(shù)（例如光漂白后的熒光恢復(fù)（FRAP）或光漂白中的熒光損失（FLIP））使細胞和蛋白質(zhì)的研究運動更,，直接,，且破壞更少。PAFP標(biāo)記的單個細胞,，細胞器或蛋白質(zhì)部分可以使用聚焦光束進行光轉(zhuǎn)換,。然后，可以直接看到活體組織內(nèi)的激活對象[Patterson and Lippincott-Schwartz,，2002; Chudakov 等,。，2004,；Chapman 等,。，2005,；Gurskaya 等,。，2006,；Chudakov 等,。，2007],。近年來,，PAFP成為超分辨率成像技術(shù)*的工具[Subach 等。,，2010],。
蛋白質(zhì)降解研究
PAFP允許仔細確定蛋白質(zhì)半衰期[Zhang 等,。，2007],。用編碼與PAFP融合的靶蛋白的構(gòu)建體轉(zhuǎn)染細胞,。融合蛋白和相應(yīng)熒光信號的穩(wěn)態(tài)濃度取決于蛋白合成和成熟速率以及蛋白降解速率。PAFP在整個細胞中進行光轉(zhuǎn)化后,，會出現(xiàn)一組*的熒光分子,，這與新的PAFP分子的合成和成熟無關(guān)。因此,，活化熒光的衰減直接對應(yīng)于PAFP標(biāo)記的蛋白質(zhì)的降解,。激活信號的延時成像可以實時量化單個細胞水平的降解過程。
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