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anatrace技術公告100如何純化膜蛋白膜

閱讀:1600          發(fā)布時間:2020-3-12

北京華新康信生物科技有限公司代理anatrace品牌,。北京華新康信生物科技有限公司是anatrace品牌代理商。

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產品列表如下:

產品貨號       產品名稱       品牌

F310 1 GM     Fos-Choline-13, Anagrade  anatrace

NG310    Lauryl Maltose Neopentyl Glycol anatrace

D310      n-Dodecyl-β-D-Maltopyranoside, Anagrade   anatrace

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試劑盒包含以下每種物質1克:CHAPS,,CYMAL-5,,Fos-Choline-12,n-Decyl-b-D-美洛吡喃糖苷,,

n-十二烷基-b-麥芽吡喃糖苷和n-辛基-b-D-葡糖苷核苷,。

D399-C14-CYMAL洗滌劑套裝

4個洗滌劑,每個1克•D399-C14

D399-C14:CYMAL洗滌劑套裝

試劑盒包含以下每種物質1克:CYMAL-1,、2,、3和4。

 

技術公告100如何純化膜蛋白膜

蛋白的研究在過去幾年中取得了顯著的進展,。 這在一定程度上要歸功于用于操縱這類蛋白質的工具和試劑的進步,。 洗滌劑在膜蛋白的提取,、純化和操作中起著重要作用,它們的兩親性使它們能夠與疏水性膜蛋白相互作用,,使它們在自然的雙分子層環(huán)境之外保持水溶性,。 不幸的是,溶解性并不總是轉化為天然結構和穩(wěn)定性; 用于萃取的洗滌劑可能與凈化和 / 或生化研究不兼容,。 此外,,適用于一種膜蛋白的洗滌劑可能不適用于另一種膜蛋白。 雖然沒有一套關于清潔劑用于膜蛋白的“ 法則” ,,但是了解如何凈化膜蛋白在開始你的研究工作時是很有用的,。 1. 從類似的來源和類似的薄膜中尋找其他的凈化物。 不同的組織,、生物和膜類型有時需要不同的清潔劑和條件; 例如,,細菌來源可能需要哺乳動物來源的不同溶解程序。

*分散和脂質過濾是色譜分離成功的關鍵,。 如果蛋白質不能從其他蛋白質中分離出來,,并且大量附著的磷脂被去除,那么蛋白質就不能根據自身的特性進行結合和色譜分析,。 相反,,它會在附著的其他蛋白質和脂質的基礎上表現異質性。3,。 一種有利于增溶完整膜和去除多余脂質的清潔劑可能不是繼續(xù)純化“裸蛋白”的佳選擇(可能太粗糙),。 因此,在初的步驟中,,你可能想要選擇一種相對便宜,、相對純凈的洗滌劑,這種洗滌劑可以很容易地換成另一種,。 例如,,膽酸鹽和類固醇清潔劑都是強烈的,帶電的或兩性離子的,,類固醇清潔劑可以很好地破壞薄膜,,有助于去除色譜步驟中多余的脂質,例如羥基磷灰石,。 他們也有一個高臨界膠束,,這意味著他們可以很容易地通過透析或交換另一個柱。

色譜純化需要一種良好的分散清潔劑,,既能穩(wěn)定蛋白質,,又不會使酶失活。 對許多人來說,,triton x-100是非常適合的,,但是污染物和280納米吸光度的問題,。 十二個碳鏈長度的碳氫化合物尾巴通常是必要的良好的穩(wěn)定和分散,特別是較大的多亞基酶,。 十二烷基麥芽糖苷的效果通常和海衛(wèi)一一樣好,,甚更好,沒有任何缺點,。 短鏈洗滌劑和一些帶電洗滌劑會分離多亞基蛋白質,。 在這個階段,反復試驗是非常重要的,,要注意保持足夠高的洗滌劑與蛋白質的比例,,以確保蛋白質能夠很好地分散(洗滌劑的濃度將遠遠高于 cmc)。 即使一種蛋白質在某種特定的洗滌劑中不活躍,,如果你能證明這種活躍是可逆的,,通過添加脂質或其他洗滌劑,你仍然可以使用它,。

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