分光光度計(jì)是一種用于測量物質(zhì)在紫外,、可見和近紅外光譜區(qū)域的吸收特性的分析儀器?,。其基本工作原理基于物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收,即不同物質(zhì)對(duì)不同波長的光具有不同的吸收能力,。當(dāng)一束單色光通過含有吸收物質(zhì)的溶液時(shí),,溶液對(duì)光的吸收程度與溶液的濃度和光程長度成正比?12。
分光光度計(jì)主要由光源,、單色器,、樣品池和檢測器四個(gè)部分組成。光源提供連續(xù)光譜的光,單色器將復(fù)合光分解為單色光,,樣品池用于盛放待測溶液,,檢測器則測量透過樣品后的光強(qiáng)度?13。
分光光度計(jì)的操作原理基于朗伯-比爾定律,,即一束單色光通過含有吸收物質(zhì)的溶液時(shí),,溶液對(duì)光的吸收程度與溶液的濃度和光程長度成正比。具體來說,,當(dāng)一束單色光通過液層厚度為b的有色溶液時(shí),,溶質(zhì)吸收了光能,光的強(qiáng)度會(huì)減弱,,減弱的光強(qiáng)與溶液的濃度和光程長度成正比關(guān)系?45,。
在實(shí)際操作中,首先需要選擇合適的波長,,因?yàn)椴煌镔|(zhì)在不同波長下的吸收特性不同,。然后,將待測溶液放入樣品池中,,啟動(dòng)分光光度計(jì)進(jìn)行測量,。通過測定標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測樣品溶液的吸光度,可以求出待測樣液的濃度,。需要注意的是,,測量時(shí)應(yīng)控制吸光度在合適的范圍內(nèi),以減少誤差?45,。